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编号:458550
八味沉香散含药血清对H9c2细胞氧糖剥夺损伤的保护机制研究 Δ
http://www.100md.com 2023年1月14日 中国药房 2023年第1期
氧化应激,试剂盒,1材料,1细胞与动物,2主要仪器,3主要药品与试剂,2方法,1八味沉香散含药血清的制备,2细胞培养,3细胞分组,造模与给药,4细胞存活率检测,5细胞生化指标检测,6细胞形态观察
     宫佰会,岳栋芳,李彩霞,官敏,李永芳 (青海大学医学院,西宁 810001)

    心肌缺血是心血管系统的常见病,严重威胁人类生命健康,临床迫切需要安全有效的药物防治心肌缺血。八味沉香散是中国传统藏药复方之一,其源于藏族医药经典著作《四部医典》。该复方由沉香200 g、肉豆蔻100 g、广枣100 g、石灰华100 g、乳香100 g、木香100 g、诃子(煨)100 g、木棉花100 g组成,气芳香,味咸、涩、微苦,具有清心热、养心、安神、开窍之功效,主要用于热病攻心、神昏谵语,临床上主要用于治疗冠心病、心绞痛等[1]。作者课题组前期研究发现,八味沉香散能够降低由于冠状动脉结扎引起的心肌缺血再灌注损伤和氧化应激反应[2—4]。不同方式的八味沉香散提取液对异丙肾上腺素、垂体后叶素导致的大鼠心肌收缩功能和舒张功能的下降[4—6]、心电图 J点位移的程度[2,7]等均有显著的改善作用,可抑制氧化应激反应并促进抗凋亡基因的表达等[8]。血清药物化学研究发现,给予八味沉香散后大鼠血清中共鉴定出16种非挥发性成分、24种挥发性成分,其中30种为原型化合物的入血成分[9]。本实验采用血清药理学方法,进一步研究在氧糖剥夺损伤细胞模型中,八味沉香散含药血清改善心肌缺血损伤的可能机制,以期为八味沉香散的临床应用提供实验依据,促进其现代化研究。

    1 材料

    1.1 细胞与动物

    本研究所用细胞为大鼠H9c2细胞(货号CL-0089),购自武汉普诺塞生命科技有限公司。SPF级雄性SD大鼠50只,体质量200~220 g,购自西安交通大学[实验动物使用许可证号:SYXK(青)2020-0001],饲养于青海大学医学院药学系实验中心(正常光照、自由饮食)。本实验所有操作均符合实验动物伦理学要求,并通过青海大学动物伦理委员会批准(伦理号2021-01)。

    1.2 主要仪器

    本研究所用主要仪器有SW-CJ-1F型超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司),51119770DP型酶标仪、Pico21型台式高速低温冷冻离心机(美国Thermo Fisher Scientific公司),DMi8型荧光显微镜、DMi1型倒置显微镜(德国Leica公司),Amersham Imager 600型显影仪(美国通用电气公司),CytoFLEX S型流式细胞仪(美国Beckman Coulter公司)。

    1.3 主要药品与试剂

    本研究所用主要药品为八味沉香散,购自西藏神猴药业有限责任公司(批号20210601) ......

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