刘 明，刘熙鹏，李 淳，甄 诚，刘春江，王海洋，巩建青(河北北方学院附属第一医院神经外科，河北 张家口 075000)

    胶质瘤是成人中枢神经系统常见的恶性原发性脑肿瘤[1]。神经胶质瘤是胶质瘤的常见类型之一，具有侵袭性，且患者预后不佳[2]。由于大脑中枢神经系统结构的特殊性(如存在血脑屏障)，使得药物研发面临诸多挑战[2]。尽管研究者在肿瘤诊断方式和治疗策略方面取得了新的进展，但神经胶质瘤患者的病死率仍然很高[3]。因此，寻找更有效的神经胶质瘤治疗手段十分必要。

    水飞蓟素(silymarin，SM)是一种多酚类黄酮，具有抗氧化、抗癌等多种生物活性[4]。据报道，SM 可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖，促进其凋亡[5]；同时，其可抑制胶质瘤皮下移植模型裸鼠体内肿瘤的生长[6]。以上研究均表明，SM具有一定的抗癌活性。相关研究显示，抑制蛋白激酶B(protein kinase B，又称Akt)/促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)信号通路可抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖、迁移和侵袭[7]；SM 可通过MAPK 信号通路来促进人肺腺癌A549 细胞的凋亡[8]。可见，Akt/MAPK信号通路可能是SM调控神经胶质瘤等肿瘤细胞增殖、凋亡的潜在途径之一。基于此，本研究拟探讨SM对人神经胶质瘤细胞增殖、凋亡及裸鼠体内移植瘤生长的影响，并通过Akt/MAPK信号通路探究其潜在作用机制，为神经胶质瘤的临床治疗提供参考。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器包括BPN-50CH型CO2培养箱(上海五久自动化设备有限公司)、ST-360 型酶标仪(上海科华实验系统有限公司)、FACS Calibur型流式细胞仪(美国Beckman Coulter 公司)、DYCZ-MINI 4 型四板垂直电泳仪(北京六一仪器有限公司)、CX33型显微镜(日本Olympus 公司)、EC3 型凝胶成像系统(美国UVP 公司)等。

    1.2 主要试剂

    SM 对照品(批号XKB0213，纯度≥98%)购自上海晅科生物科技有限公司；SC79对照品(Akt激活剂，批号HY-18749，纯度≥98%)购自美国MCE 公司；CCK-8 试剂盒(批号CK04)购自深圳市纽邦生物科技有限公司；Annexin Ⅴ-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒(批号CA001)购自南京莱富赛生物科技有限公司；兔源增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen ......