陈相龙 ，赵 杨 ，黄琼叶 ，徐铭卿 ，李 悦 ，陆 超 ，孙鲁宁 ，王永庆 #b(1.徐州医科大学药学院/江苏省新药研究与临床药学重点实验室，江苏 徐州 10004；.南京医科大学第一附属医院临床药理研究室，南京1009；.江苏省妇幼保健院儿科，南京 1006)

    早产儿呼吸暂停(apnea of prematurity，AOP)是指早产儿呼吸暂停时间超过20 s，或呼吸暂停持续时间不足20 s 但伴有皮肤青紫、心动过缓、血氧下降等情况[1]，严重者会导致机体严重缺氧，从而引起并发症，甚至死亡。

    咖啡因是预防和治疗AOP的首选药物，与其他甲基黄嘌呤类药物相比，咖啡因的半衰期更长，治疗范围更广，成本效益更高[2—3]。咖啡因主要经肝脏代谢，可生成茶碱、可可碱和副黄嘌呤3种主要代谢产物，其中茶碱具有类似咖啡因的兴奋作用但相对较弱，可可碱和副黄嘌呤具有轻微的中枢神经系统刺激作用，能促进呼吸[4—5]。咖啡因的代谢和排泄很大程度取决于肝药酶和肾功能的发育程度[4，6]。由于早产儿体内肝药酶不足，肾功能尚未发育成熟，因此，咖啡因在早产儿体内的血浆清除率极低，半衰期可达101 h，易产生蓄积，而引发烦躁不安、呕吐、心动过速、脑和肠系膜血流速度降低等不良反应，还可增加脑出血和坏死性小肠结膜炎的发生风险[7—8]。

    目前，关于咖啡因治疗的最佳剂量和时机尚无标准方案，尤其是胎龄小于29 周的早产儿[7]。因此，咖啡因治疗AOP时，更加需要注意药物剂量和浓度监测。有研究表明，在早产儿的血液和尿液中，咖啡因的血药浓度和尿药浓度具有相关性[9]，这提示可以通过检测早产儿尿液中的咖啡因浓度来调整用药剂量，以避免血样采集对早产儿造成的创伤。基于此，本研究采用高效液相色谱-串联质谱(high performance liquid chromatographytandem mass，HPLC-MS/MS)技术测定了早产儿尿液中咖啡因及3种代谢产物(茶碱、可可碱、副黄嘌呤)的浓度并应用于临床，以分析早产儿体内咖啡因代谢的特点，旨在为咖啡因最佳剂量的探寻提供方法学基础，也为患儿的个体化治疗和临床安全用药提供依据。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器包括1290 Infinity型高效液相色谱仪(美国Agilent公司)、API 4000型三重四极杆液质联用仪(美国应用生物系统公司)、BP 211D 型电子天平(德国Sartorius 公司)、PCB-11 型涡旋混合仪(德国Eppendorf公司)、Stratos型高速冷冻离心机[赛默飞世尔科技(中国)有限公司]、Milli-Q Gradient 型纯水仪[密理博(中国)有限公司] ......