孙 哲，刘 莲，张泰魏，王 琪，周意园，张昌容，华诏召#(.贵州中医药大学第一附属医院妇科，贵阳 55000；.贵州医科大学临床微生物与免疫学教研室，贵阳 55000；.贵州中医药大学第一附属医院优生研究中心，贵阳 55000；.贵州中医药大学第二附属医院产科，贵阳 55000)

    先兆流产是女性妊娠早期出现的腰痛、下腹痛或阴道出血等症状，若不及时进行干预治疗最终会导致流产，甚至给母体生命安全带来危害，严重影响孕妇身心健康及家庭幸福。免疫细胞分化异常及其产生的细胞因子失衡是妊娠失败及流产的重要原因，纠正Th1/Th2型细胞因子的病理偏移状态可改善先兆流产患者内分泌水平，并减轻其症状[1—2]。此外，磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinases，PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B，AKT)信号通路与细胞代谢、免疫调节和激素水平调节有关，参与介导了药对黄芩-白术对先兆流产的治疗过程[3]。激活PI3K/AKT信号通路可降低Th1/Th2比值，减轻免疫炎症，进而促进肾移植存活[4]；还可减轻巨噬细胞M1 极化，进而通过抑制炎症来改善脂多糖诱导的小鼠流产症状[5]。由此可知，通过激活PI3K/AKT信号通路来改善Th1/Th2平衡可能是防治先兆流产的重要手段。

    当归多糖是中药当归中的天然多糖类物质，可通过减少促炎因子的表达和释放，进而抑制妊娠期易栓症模型大鼠的血栓形成[6]。此外，胡燕等[7]研究表明，当归多糖可上调PI3K/AKT 信号通路相关蛋白表达，并降低复发性流产模型大鼠的胚胎死亡率。但当归多糖是否可通过激活PI3K/AKT信号通路来改善先兆流产患者Th1/Th2平衡，并发挥保胎作用目前还不清楚。鉴于此，本研究通过构建先兆流产大鼠模型，探究当归多糖调节PI3K/AKT 信号通路对其Th1/Th2 平衡及胚胎存活的影响，旨在阐明当归多糖防治先兆流产的作用机制。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    RAYTO RT-2100C 型自动酶标仪购自北京华仪通泰环保科技有限公司；HS-3090 型冰冻切片机购自北京德耳斯仪器有限公司；EVOS M7000 型显微镜、AttuneTMNxT 型流式细胞仪均购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司；DYY-6C型双稳电泳仪、HE-120型电泳槽、VE-186型转印电泳槽均购自南京普阳科学仪器研究所。

    1.2 主要药品与试剂

    当归多糖(批号CY110320，纯度98%)购自陕西慈缘生物技术有限公司；米非司酮(批号410003-201301 ......