芒果苷对心肌细胞损伤的保护作用及对NFATc4表达的影响Δ
存活率,氧化应激,1材料,1主要仪器,2主要药品及试剂,3细胞株,2方法,1细胞培养,2细胞相对存活率检测,3细胞上清液中SOD,CAT,MDA水平检测,4细胞ROS水平检测,5细胞凋亡相关蛋白和核蛋
韦啟球,高思,冯艺萍,裴世成,刘雪萍 (广西科技大学医学部药学系,广西 柳州 545005)持续的病理性心脏肥大最终可导致心力衰竭,而病理性心脏肥大的发生和发展被认为是多种复杂因素综合作用的结果[1]。目前,临床尚缺乏有效手段来延缓或逆转心脏肥大向心力衰竭进展。研究发现,在慢性心力衰竭患者和心力衰竭动物模型中均存在高水平的氧化应激,且氧化应激与不良预后密切相关[2]。氧化应激损伤涉及多方面因素,过氧化物的堆积可直接造成细胞器损伤及多种功能紊乱,促进心肌重构和病理性心脏肥大的发展,并最终引发心力衰竭[3]。传统天然药物在抗肿瘤等领域表现出良好的抗氧化应激作用,然而其在心血管相关疾病中的价值尚有待发掘;同时,在心脏肥大机制和有效治疗方法研究领域中,揭示氧化应激在心脏肥大发展中的作用机制、寻找有效的天然药物等也备受学者关注。
芒果苷为双苯吡酮类化合物,主要从芒果叶中提取而得,具有显著的抗氧化、抗炎作用,且因具有良好的成药性而被广泛用于改善咳嗽、咳痰等呼吸系统症状[4—5]。研究指出,芒果苷可通过激活核转录因子红系2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/抗氧化响应元件(antioxidant response element,ARE)通路、促进抗氧化酶表达等途径来改善多种原因造成的氧化应激损伤[6—7]。有研究指出,活化T细胞核因子c4(nuclear factor of activated T cells cytoplasmic 4,NFATc4)是促进心脏肥大的重要转录因子,其被激活后可结合到心房钠尿肽(atrial natriuretic factor,ANF)、B型利尿钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)的启动子上,从而促进肥大基因的表达[8]。同时多项研究证实,NFATc4在诱导氧化应激和促进细胞凋亡中也具有重要作用[9]。本研究拟以大鼠H9c2细胞为对象,以过氧化氢(H2O2)为诱导剂[10],通过检测凋亡相关蛋白、活性氧(reactive oxygen species,ROS)和抗氧化酶活性的变化,探讨芒果苷对H2O2致氧化应激的影响,并初步考察该作用是否与NFATc4有关,以期为证实芒果苷改善氧化应激的潜能提供依据,为心脏肥大的治疗挖掘新靶点、提供新思路。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所用主要仪器包括3111型细胞培养箱、Model-450型酶标仪、Multiskan MK3型酶标仪(美国Thermo Fisher Scientific公司) ......
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