蔡 金 ，华诏召 ，张昌容 ，黄 丹 ，张淇华 ，王 毅 ，周素芳 ，刘 莲 ，龚 安 (.贵州中医药大学第一附属医院中医经典科，贵阳 55000；.贵州中医药大学第二附属医院产科，贵阳 55000；.贵州中医药大学微生态研究中心，贵阳 55000；.贵州医科大学临床微生物与免疫学教研室，贵阳 55000；5.江西中医药大学岐黄国医书院，南昌 005)

    哮喘是一种常见的以气道高反应性和气道炎症为特征的疾病，以咳嗽、喘息、胸闷和呼吸困难为主要症状，无法治愈。除了避免接触过敏原，只能使用β 肾上腺素受体激动剂、吸入性皮质类固醇或白三烯D4 受体拮抗剂治疗哮喘，但长期使用上述药物容易引发白内障、骨质疏松等不良反应，故寻找新的治疗方案至关重要[1]。异钩藤碱(isorhynchophylline，IRN)是钩藤的主要活性成分之一，具有抗高血压、保护神经、抗增殖和抗炎等多种生物学效应[2]，主要用于治疗心血管和中枢神经系统疾病[3]。Zhu 等[4]研究发现，IRN 能抑制炎症因子的产生以及气道平滑肌细胞的增殖并诱导其凋亡，具有治疗哮喘的潜在作用。单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein-1，MCP-1)也被称为CC 趋化因子配体2(CC chemokine ligand 2，CCL2)，是CC 趋化因子家族的成员，可与CC 趋化因子受体2(CC chemokine receptor 2，CCR2)结合，在单核巨噬细胞和T 细胞的迁移中起关键作用，是治疗慢性炎症性疾病和急性肺损伤的潜在靶点[5―6]。基于以上文献，本研究拟探讨IRN 调节MCP-1/CCR2 信号通路对哮喘小鼠气道炎症反应的影响，旨在为寻找治疗哮喘新药提供参考。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    402AI型超声雾化器购自江苏鱼跃医疗设备股份有限公司；CX43 型光学显微镜购自日本Olympus 公司；elx808型多功能酶标仪购自美国BioTek公司；IC1000型全自动细胞计数器购自北京众力挽生物科技有限公司；RM2235型石蜡切片机购自德国Leica公司。

    1.2 主要药品与试剂

    IRN 对照品(货号Ⅱ0310，纯度≥98%)、苏木精-伊红(hematoxylin and eosin，HE)染色液(货号G1120)均购自北京索莱宝科技有限公司；醋酸地塞米松片(货号02621，规格0.75 mg)购自浙江仙琚制药股份有限公司；卵清蛋白(货号9006-59-1)购自美国Sigma Aldrich 公司；MCP-1/CCR2 信号通路激活剂CCL2 蛋白[货号JN-(Ea)-02244]购自美国R&D Systems公司；肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α ......