魏 晴，薛 娟，梁珊珊 (贵州中医药大学药学院，贵阳 550025)

    艳山姜是姜科植物艳山姜Alpiniazerumbet(Pers.)Burtt.et Smith 的干燥根及根茎，是贵州特色苗药，能温中燥湿、行气止痛，可用于心腹冷痛、胸腹胀满、消化不良、呕吐腹泻等症[1]。本课题组前期研究结果表明，艳山姜可通过抑制氧化应激和炎症反应而减轻胃黏膜损伤，对无水乙醇和阿司匹林诱导的小鼠急性胃溃疡均有明显的改善作用[2]，但关于其药效物质基础和分子机制尚不明确。有研究指出，黄酮类成分是艳山姜中的主要成分，其中二氢-5，6-脱氢香豆素、5，6-脱氢卡因均具有抗实验性溃疡的作用，二氢-5，6-去氢醉椒素、5，6-去氢醉椒素均能拮抗实验性胃溃疡和十二指肠溃疡，山柰酚可通过调控白三烯C4和前列腺素E的表达而发挥抗溃疡作用[3―4]。由此推测，黄酮类成分可能是艳山姜抗溃疡的有效成分。

    微RNA(microRNA，miRNA)是内源性的小非编码RNA(长度为17～25 个核苷酸)，可通过直接与靶基因的3′-非翻译区(3′-untranslated region，3′-UTR)结合来负向调控该靶基因的表达，从而参与多种生理过程[5―6]。研究指出，miRNA-146a-5p(miR-146a-5p)过表达可降低核因子κB p65(nuclear factor-κB p65，NF-κB p65)蛋白及mRNA 的表达水平，同时还能减少炎症因子[肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和白细胞介素1β(interleukin-1β，IL-1β)]的分泌，并可负向调控应激性胃溃疡的炎症反应，从而发挥抗胃溃疡作用[7]；进一步研究表明，miR-146a-5p 可通过预测靶蛋白肿瘤坏死因子受体关联因子6(TNF receptor-associated factor 6，TRAF6)而进一步影响NF-κB 的下游通路，抑制人肝星状细胞中相关细胞因子的信号转导，对炎症反应具有重要的调节作用[8]。基于艳山姜的传统功效、miRNA的研究进展和本课题组的前期探索，本研究拟以人胃黏膜细胞为对象，以无水乙醇诱导建立急性胃溃疡模型，通过检测细胞中miR-146a-5p 与胃溃疡、炎症相关指标的表达/含量，探讨艳山姜总黄酮能否通过调控miR-146a-5p来发挥抗胃溃疡作用，为艳山姜及其活性成分的开发及利用提供实验基础。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器包括CFX96 型定量实时聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR ......