曹梓珍，张 琳，傅若秋，赵祎博，陈 翔，陈剑鸿 (陆军特色医学中心药剂科，重庆 400042)

    胶质母细胞瘤(glioblastoma，GBM)又称恶性胶质瘤，是中枢神经系统常见的原发性恶性肿瘤，约占所有中枢神经系统肿瘤的33%，具有恶性程度高、致死率高、复发率高的特点[1―2]。目前，GBM 的临床治疗以手术治疗联合放疗及替莫唑胺化疗的传统疗法为主，但该疗法不良反应大，患者易出现化疗耐药且预后较差[2]，因此迫切需要寻找高效、低毒的辅助药物或替代疗法。

    近年来，天然产物在肿瘤研究领域扮演了重要角色。藜芦胺(veratramine，VTM)为甾体生物碱类成分，是百合科植物藜芦的有效成分之一。体外研究表明，VTM可通过诱导肿瘤细胞自噬、凋亡来抑制其增殖[3―4]。铁死亡是一种由铁依赖性脂质活性氧(reactive oxygen species，ROS)异常累积所引发的非凋亡性程序性死亡方式，与恶性肿瘤、神经退行性疾病等多种疾病密切相关，并在肿瘤细胞生长、耐药等方面发挥着重要作用[5]。本课题组前期预实验证实，VTM可抑制GBM细胞的增殖，但这种作用是否与铁死亡过程有关以及其具体作用机制尚不清楚。为此，本研究拟通过网络药理学方法预测VTM 作用于GBM 的潜在靶点、基因功能及信号通路；同时，拟借助体外细胞实验，初步验证该成分通过诱导铁死亡来抑制GBM 细胞活性的可能机制，以期为GBM治疗和新药研究提供新思路。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器包括3111型CO2细胞培养箱、EVOSF1型荧光显微镜(美国Thermo Fisher Scientific公司)，CKX41 型光学倒置显微镜(日本Olympus 公司)，STNERGYH1 型酶标仪(美国Agilent 公司)，C6 型流式细胞仪(美国BD 公司)，165-8001 型蛋白电泳仪、ChemⅠ Doc 型超高灵敏度化学发光成像系统(美国Bio-Rad公司)等。

    1.2 主要药品与试剂

    VTM 原料药(批号HY-N0837，纯度99.61%)、CCK-8试剂盒(批号HY-K0301)均购自美国MedChemExpress公司；DMEM高糖培养基(批号2327860)、胎牛血清(批号10091148)均购自美国Gibco 公司；4%多聚甲醛固定液(批号P0099)、结晶紫染色液(批号C0121)、胰酶消化液(批号C0201)、Western blot细胞裂解液(批号P0031)、BCA 蛋白浓度测定试剂盒增强型(批号P0009)、2′ ......