铁皮石斛多糖的提取工艺及对小鼠急性肺损伤改善作用的研究Δ
1材料,1主要仪器,2主要药品与试剂,3实验动物,2方法与结果,1铁皮石斛多糖的提取,2铁皮石斛多糖含量和提取率测定,3铁皮石斛多糖提取工艺优化,4铁皮石斛多糖对小鼠ALI的影响,3讨论
刘子菁,从静文,程 卓,牟 琳,吴汐柔,王子豪,杨俊颜,信小兵 (新疆第二医学院药学院,新疆 克拉玛依 834000)铁皮石斛为兰科植物铁皮石斛Dendrobiumoffici-naleKimura et Migo的干燥茎,主要分布在我国安徽、四川、浙江、云南、江西等地。该药主要含有多糖、生物碱、氨基酸和微量元素等化学成分,具有抗肿瘤、抗衰老、抗急性肺损伤(acute lung injury,ALI)、扩张血管和抗血小板凝集等多种药理作用[1]。目前,国内外多糖的提取方法很多,主要包括浸渍法、回流法、超声法、微波法、酶解法、闪式提取法、冻融提取法等,但单一提取法存在提取率低、工艺复杂、提取物杂质多等弊端[2]。
ALI是一种由各种肺内(吸入、注射、感染及创伤等)或肺外(休克、脓毒症等)致病因素导致肺泡结构受损而引发肺部弥散性炎症和水肿反应的呼吸系统疾病。目前,临床尚无治疗ALI 的特效药物,故其病死率维持在较高水平,整体病死率高达40%[2]。现代医学认为,ALI的病理学机制主要与肺组织局部过度的氧化应激和炎症反应有关[3―4]。多糖作为铁皮石斛的主要活性成分,具有抗炎、抗氧化作用,且毒性极低[5―6]。基于此,本研究以铁皮石斛为原料,采用超声辅助热水浸渍法提取铁皮石斛多糖,通过单因素实验和Box-Behnken 响应面法优化提取工艺,并考察铁皮石斛多糖对小鼠ALI 的影响,为铁皮石斛多糖的提取及药效研究提供理论依据。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所用主要仪器包括UV1802G型紫外-可见分光光度计(天津冠泽科技有限公司)、FW135 型粉碎机(北京市永光明医疗仪器有限公司)、LEICARM2245 型石蜡切片机(常州市雅博电子设备有限公司)、Axio-ImagerA2型蔡司正置荧光显微镜(北京博瑞斯科技有限公司)等。
1.2 主要药品与试剂
铁皮石斛药材购自南宁市药材市场,经广西中医药大学药学院谭勇教授鉴定为兰科植物铁皮石斛D.officinaleKimura et Migo 的干燥茎;醋酸泼尼松片(批号20220313,规格5 mg)购自上海金不换兰考制药有限公司;浓硫酸(批号20190301)购自新疆德瑞生物有限公司;苯酚(分析纯)购自天津市风船化学世纪科技有限公司;D(+)-无水葡萄糖对照品(批号110833-201906,纯度≥98%)和脂多糖对照品(批号20220208,纯度≥98%)均购自北京索莱宝科技有限公司;苏木精-伊红(HE)染色试剂盒(批号20190608)、Masson 染色试剂盒(批号20180302)均购自南京建成生物工程研究所 ......
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