冯明庆 ，杨 楠 ，方 媛 ，廖太阳 ，王培民 ，刘子修 #(1.南京中医药大学附属医院骨伤科，南京210029；2.江苏省中医院骨伤科，南京 210029)

    膝骨关节炎(knee osteoarthritis，KOA)是涉及到软骨、软骨下骨、韧带、关节囊、滑膜以及周边肌肉等结构改变的一种退行性疾病[1]。近年来由于人们生活习惯的改变，KOA已成为一种常见的疾病，对患者个人和卫生保健系统都造成很大的影响[2]。目前，针对KOA的主要治疗手段有口服非甾体抗炎药、对乙酰氨基酚[3]，关节腔内注射皮质类固醇、玻璃酸钠等[4]。然而非甾体抗炎药虽然具有一定疗效，但易引起心血管疾病，对乙酰氨基酚则会引起过敏及胃肠道不良反应；关节腔内注射则易引起感染，且可能对软骨造成不良影响[5]。

    江苏省中医院自主研发改进的“三色散”方可有效改善膝关节肿胀、疼痛，以及膝关节功能障碍等临床症状[6]，对软组织急慢性损伤及足跟疼痛也有显著治疗效果[7]。本课题组在前期研究中使用三色散药材粉碎后的药粉颗粒制备凝胶贴膏，以综合感官、初黏力、持黏力、剥离强度为评价指标筛选基质处方，得到传统工艺凝胶贴膏的最佳配比[8]，然而也发现药粉颗粒作为原料药制备所得的凝胶贴膏内含杂质较多，手感较为粗糙；但若只进行粉碎过筛，所得产物中含有大量不含药理活性的成分，在目前固定投药量的制备方法下有效成分的含量低于溶剂提取方法，且存在不便于贮存及较难制定质量评价标准的缺点。故本研究通过比较三色散凝胶贴膏原料药在不同提取方式下制备所得的凝胶贴膏的抗炎镇痛药效与方中主要成分的含量，来优化其提取方式。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    Alliance 2695e 型高效液相色谱仪购自沃特世科技(上海)有限公司；7500型实时定量PCR仪购自美国Applied Biosystems 公司；35150 型冷热板购自意大利Ugo Basile 公司；Enspire 型酶标仪购自珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司；BioPhotometer型核酸蛋白测试仪购自德国Eppendorf公司；Mini-protein Tetra型电泳及转膜仪购自美国Bio-Rad 公司；LAS4000 型超灵敏化学发光成像系统购自美国GE公司；MS105DU型电子天平购自梅特勒托利多科技(中国)有限公司。

    1.2 主要药品与试剂

    三色散(由蔓荆子、紫荆皮、当归、木瓜、丹参、赤芍、白芷、片姜黄、独活、羌活、天花粉、川牛膝、威灵仙、防己、防风、马钱子、秦艽、连翘、川芎、甘草按16∶16∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶4∶2∶2∶2∶1 的质量比混合而成 ......