王 锦，夏霜莉，杨 媛，代 蓉#(.云南中医药大学中药学院，昆明 650500；.昆明医科大学第一附属医院临床药学中心，昆明 65003)

    神经血管单元(neurovascular unit，NVU)主要包括神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞、脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells，BMECs)、细胞外基质等，各组成间相互协调，共同维持脑组织内环境的整体稳态。脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemic reperfusion injury，CIRI)发生后，BMECs、胶质细胞被激活，血脑屏障通透性发生改变，神经元受损凋亡，导致NVU的稳态失衡，从而影响神经系统功能[1―2]。相关研究发现，在NVU微环境中，BMECs不仅可为神经元提供突触间信号传递时所需要的能量，还可在CIRI情况下通过释放脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)调控神经元活性，发挥神经保护作用[3―4]。因此，通过药物干预加强BMECs 与神经元之间的信号联系以促进机体自身的内源性修复，对CIRI的治疗具有重要的意义。

    本课题组前期研究表明，天麻主要活性成分3，4-二羟基苯甲醛(3，4-dihydroxybenzaldehyde，3，4-DD)具有减轻大脑中动脉闭塞再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion，MCAO/R)模型大鼠脑损伤，保护受损神经元的作用[5―7]，但作用机制尚不明确。目前常以神经元和BMECs 共培养模拟NVU[8]，但是由于原代神经元生长周期长，无法进行传代，故常用中分化型的大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12 代替神经元进行研究[9]。基于此，本研究采用Transwell小室建立BMECs-PC12共培养氧糖剥夺/复糖复氧(oxygen and glucose deprivation/reperfusion，OGD/R)损伤模型，探讨3，4-DD 对CIRI 的改善作用及机制，以期为CIRI的治疗药物开发提供参考。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    3111 型CO2细胞培养箱、QuantStudio 5 型实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)仪购自美国Thermo Fisher Scientific 公司；Ti-S 型倒置相差显微镜购自日本Nikon公司；Infinite M200 PRO型酶标仪购自瑞士Tecan公司；ERS-2型细胞电阻仪、Transwell小室(孔径0.4 μm ......