安罗替尼通过调控NF-κB信号通路对脑胶质瘤细胞恶性表型的影响 Δ
激活剂,1材料,1主要仪器,2主要药品与试剂,3细胞,2方法,1人脑胶质瘤T98G细胞培养,2安罗替尼对T98G细胞恶性表型影响的考察,3安罗替尼对T98G细胞恶性表型影响机制的验证,4统计学
柳 新 ,李青山 ,谢云鹏 ,张圣林 ,董 怡 (.承德医学院附属医院肿瘤科,河北 承德 067000;.承德医学院附属医院神经外科,河北 承德 067000)脑胶质瘤恶性程度高、发展速度快,为临床常见颅内恶性肿瘤,具有高复发率和高病死率的特点。由于脑胶质瘤的位置特殊,早期症状不明显,故大多数患者在确诊时已处于中晚期,错过了最佳手术治疗时机,加之手术后复发率和转移率较高,放化疗毒副作用极大,严重影响了患者的生存质量[1]。可见,探究有效且安全的药物对于脑胶质瘤患者的临床治疗十分必要。
安罗替尼作为一种多靶点酪氨酸激酶抑制剂,对多种生长因子受体激酶具有抑制作用,且能通过抑制相关转移信号通路来发挥抗肿瘤作用[2]。研究指出,肿瘤细胞的迁移、侵袭与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)关系密切,当EMT 发生后,肿瘤细胞更具侵袭力,可进一步入侵周围组织、血管及淋巴管等,从而发生远处转移[3]。核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路是经典的信号转导通路,能参与调控肿瘤细胞迁移、侵袭、EMT、血管生成等过程[4―5]。可见,阻断NF-κB 信号通路可作为改善肿瘤细胞恶性表型的重要途径。基于此,本研究拟探讨安罗替尼调控NF-κB信号通路对人脑胶质瘤细胞T98G 黏附、迁移、侵袭及EMT样进程的影响,旨在为该药治疗脑胶质瘤提供理论依据。
1 材料
1.1 主要仪器
本研究所用主要仪器包括MCO18AIC 型CO2培养箱(日本SANYO 公司)、Multiskan FC 型酶标仪(美国Thermo Fisher Scientific 公司)、WMS-1033 型倒置荧光显微镜(上海无陌光学仪器有限公司)、FluorChem HD2型凝胶成像系统(美国ProteinSimple公司)等。
1.2 主要药品与试剂
安罗替尼对照品(货号S8726,纯度≥98%)购自美国Selleck Chemicals 公司;5-氟尿嘧啶对照品(阳性对照,货号S17073-5g,纯度≥98%)、NF-κB 通路抑制剂BAY 11-7082 对照品(批号J07HS173399,纯度≥98%)均购自上海源叶生物科技有限公司;NF-κB通路激活剂prostratin 对照品(批号0000112801,纯度≥98%)购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司;胎牛血清购自美国Gibco公司;DMEM-H培养基购自北京索莱宝科技有限公司;RIPA 裂解液、CCK-8 试剂盒均购自日本Dojindo公司;重组人纤维连接蛋白(recombinant human fibronectin ......
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