姬健钧，邱文奎 (开封市中心医院骨科二病区，河南 开封 475000)

    骨肉瘤具有局部侵袭、快速浸润转移和组织特异性等特性，是青少年和儿童中最为常见的原发性骨恶性肿瘤，给患者生命健康和生活质量带来了严重威胁。目前，临床上针对骨肉瘤的治疗方式仍以常规的手术切除、放疗和化疗为主，但骨肉瘤患者易耐受并且其5年总体生存率较低[1]。因此，亟须寻找高效的辅助药物或者替代疗法。

    小檗碱是从中药黄连以及其他小檗属植物里面分离出来的异喹啉类生物碱，能够用于多种疾病的治疗，如代谢、消化、神经和心血管系统疾病以及肿瘤[2—3]。有研究指出，小檗碱能够通过诱导骨肉瘤细胞的凋亡、自噬来抑制其增殖[4—5]。铁死亡(ferroptosis)是一种新的调节性细胞死亡方式，其特征是铁离子依赖的脂质过氧化物大量蓄积，与骨肉瘤细胞生长、耐药等密切相关[6]。本课题组前期预实验发现，小檗碱可抑制骨肉瘤细胞的增殖，但采用凋亡或自噬抑制剂并不能有效缓解小檗碱诱导的骨肉瘤细胞死亡，这提示可能存在其他的细胞死亡方式。基于此，本研究以人骨肉瘤细胞MG63为研究对象，初步探讨铁死亡在小檗碱抑制MG63细胞中的作用及其可能机制，以期为临床上骨肉瘤的防治提供新的思路和治疗靶点。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用的主要仪器有：Nanodrop 2000 型超微量分光光度计(美国Thermo Fisher Scientific 公司)，Spectra Max iD型酶标仪(美国Molecular Devices公司)，DM2500 型荧光倒置显微镜(德国Leica 公司)，JEM-1400型透射电子显微镜(日本JEOL公司)，5200型化学发光图像分析系统(上海天能科技有限公司)，1658003-Mini-Protean?Tetra 小型垂直电泳装置、1703930-Mini Trans-Blot?型电泳槽(美国Bio-Rad 公司)，5452 型台式高速离心机(德国Eppendorf公司)。

    1.2 主要药品与试剂

    小檗碱对照品(批号BWB50137，纯度≥98%)购自北京北纳创联生物技术研究院；胎牛血清和DMEM 培养基均购自美国Gibco 公司；兔源信号转导及转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3，STAT3)、肿瘤蛋白53(tumor protein 53，p53)、磷酸化STAT3(phosphated STAT3 ......