李海山 ，杨和金 ，郑永仁 (1.云南省食品药品审核查验中心，昆明 650106；.云南省药物研究所药理室，昆明 650111；3.云南中医药大学动物实验中心，昆明 650500)

    绣球藤是毛茛科Ranunculaceae铁线莲属Clematis植物毛茛状铁线莲ClematisranunculoidesFranch.的干燥全草，主要分布于我国云南西北部、四川西南部、广西西北部、贵州西南部和西藏喜马拉雅地区，具有良好的药用价值和观赏价值[1]。该药始载于《滇南本草》，以全草或根入药，味苦、淡、微辛，性微寒，具有清热解毒、利尿、祛瘀通络的功效。然而，目前关于绣球藤的研究有限，其药用价值并未得到充分发掘。

    铁线莲属植物分布广泛，我国约有150种，包括威灵仙、东北铁线莲、小木通等。该属植物的主要化学成分包括皂苷类、黄酮类、木脂素类、香豆素类和生物碱类等，其中皂苷类成分以齐墩果烷型五环三萜为主，黄酮类成分以黄酮糖苷为主[2]。目前，同属植物威灵仙的相关研究较为多，其抗炎活性明确[3]。作为铁线莲属植物的一员，本课题组推测绣球藤的药理活性亦有相似之处。基于此，本研究从抗炎角度出发，通过二甲苯致小鼠耳肿胀实验和大鼠棉球肉芽肿实验评价绣球藤对急、慢性炎症的抑制活性，并探讨绣球藤对脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应的改善作用及可能机制，挖掘其药用价值，为绣球藤的进一步开发提供实验依据。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器有CCL-170A-8型CO2恒温培养箱(新加坡ESCO公司)，LSM900型激光共聚焦显微镜、Axio Observer 3型荧光显微镜(德国Carl Zeiss公司)，Multiskan GO型全波长酶标仪(美国Thermo Fisher Scientific公司)，Mini-Protean小型垂直电泳槽、Mini Trans-Blot?转印系统(美国Bio-Rad公司)，WD-9423B型化学发光分析仪(北京六一生物科技有限公司)等。

    1.2 主要药品与试剂

    绣球藤药材采自云南省大理、丽江等地，经云南中医药大学中药学院张洁教授鉴定为毛茛科铁线莲属植物毛茛状铁线莲C.ranunculoidesFranch.的全草。

    阿司匹林肠溶片(批号BJ71068，规格100 mg)购自意大利Bayer S.p.A.；LPS、二甲基亚砜(DMSO)、MTT试剂(批号分别为059M4031V、WXBB8079V、2031162)均购自美国Sigma公司；二甲苯(批号220111)购自四川西陇科学有限公司；磷酸盐缓冲液(PBS)、DMEM培养基、胎牛血清(批号分别为2436350、2522571、1997802c)均购自美国Gibco公司；RIPA裂解液、特超敏ECL化学发光试剂盒(批号分别为072021211125、P0018AM)均购自上海碧云天生物技术股份有限公司；肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α ......