华 敏，张伟丽 (滕州市中心人民医院输血科，山东 滕州 277599)

    急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)是一种异质性血液系统恶性肿瘤，以骨髓、血液和其他组织中髓系原始细胞克隆性扩增为主要特征[1―2]。尽管化疗手段有所进展，但AML 患者预后仍然较差[3]。因此，有必要进一步了解AML 的相关机制并寻找新型治疗药物。

    虎杖苷(polydatin，PD)是一种从虎杖根中分离出来的活性成分，具有抑制血小板聚集、降低血脂水平、减少脂质过氧化等多种活性。研究发现，PD 可以通过诱导细胞凋亡来抑制AML 的发展，但具体机制尚未明确[4]。上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition，EMT)是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型特征细胞的生物学过程，是肿瘤得以进展的重要分子机制之一[5]。EMT过程涉及多种标志蛋白，包括锌指转录因子Snail、上皮钙黏素(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)等[6]。环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)/蛋白激酶A(protein kinase A，PKA)是AML研究领域的常见通路，激活该信号通路可抑制AML 细胞的增殖，对AML 的治疗具有积极效果[7―8]；此外，cAMP/PKA 信号通路还可参与调控EMT 进程[9]。结合现有文献，本研究拟基于EMT和cAMP/PKA信号通路，初步探讨PD对AML细胞增殖、迁移、侵袭的影响，并通过构建裸鼠移植瘤模型，从体内水平初步验证PD的抗AML活性，以期为AML的治疗药物开发提供参考。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器包括iMark680 型多功能酶标仪、Gel Doc EZ 型凝胶成像仪(美国Bio-Rad 公司)，FACS Calibur 流式细胞仪(美国BD Biosciences 公司)，Eclipse Ti-S型倒置显微镜(日本Nikon公司)等。

    1.2 主要药品与试剂

    PD 对照品(批号20210407，纯度≥98%)购自滁州仕诺达生物科技有限公司；cAMP 抑制剂SQ22536 对照品(批号HY-100396，纯度98.41%)购自美国MedChem-Express 公司；Annexin Ⅴ-FITC/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司；MTT细胞增殖及毒性检测试剂盒购自江西艾博因生物科技有限公司；兔源vimentin、Snail、E-cadherin、PKA、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)单克隆抗体和辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG 二抗(货号分别为ab92547、ab229701、ab40772、ab75991、ab9485、ab6721)均购自英国Abcam 公司；cAMP 酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司；RPMI 1640 培养基、ECL显色试剂盒均购自北京索莱宝科技有限公司 ......