高丽，赵乐，魏楠楠，武立雅，王恬恬，张唯依，王永辉 (山西中医药大学基础医学院，山西 晋中 030619)

    创伤性颅脑损伤是由于机械外力作用于颅脑内容物导致脑组织结构损伤或功能中断，从而引起一系列分子损伤的连锁反应[1―2]。脑震荡属于轻型创伤性颅脑损伤，主要表现为记忆下降、情志异常、认知障碍等症状，多呈现出脑组织挫伤、神经性血管损伤、颅内压升高、血脑屏障破坏等原发或继发性病理特点[3]。目前脑震荡的发病率在逐年增高[4]，严重影响患者的日常生活，并给社会带来巨大的经济损失，已经成为一个亟待解决的公共卫生问题。

    脑震宁颗粒由生地黄、当归、丹参、丹皮、川芎、地龙、炒酸枣仁、柏子仁、茯苓、陈皮、竹茹11味药组成，共奏活血通络、宁心安神、除烦止呕之功效。有研究表明，脑震宁颗粒对于脑震荡、创伤性综合征、神经血管性疾病等所致的头痛头晕相关症状有很好的疗效[5]。本课题组前期研究发现，脑震宁颗粒可以增加线粒体三磷酸腺苷(adenosine triphosphate，ATP)和呼吸链复合物Ⅰ的含量，改善线粒体结构和功能，从而促进神经元的修复再生[6―7]，但其具体的作用机制尚未完全明确。Wnt信号通路可以促进脑组织的神经发生和保护，并与线粒体分布、代谢及相关动力学改变密切相关[8]。因此，本实验以Wnt信号通路为出发点，探究脑震宁颗粒调节三重脑震荡(multiple cerebral concussion，MCC)模型大鼠海马组织线粒体能量代谢的作用机制，以期为脑震宁颗粒的临床应用提供一定的科学依据。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器有：XR-XZ301型旷场及分析系统(上海欣软信息科技有限公司)，R540IE型呼吸麻醉机(深圳市瑞沃德生命科技有限公司)，UC7型超薄切片机(德国Leica公司)，HT7800型透射电子显微镜(日本株式会社日立制作所)，Pannoramic MIDI型扫描仪(济南丹吉尔电子有限公司)，KZ-Ⅲ-FP型研磨仪(武汉赛维尔生物科技有限公司)，A51119600C型酶标仪(瑞士SGS集团)，Mini MP4型电泳仪、Mini TBT型转印仪[莫纳(苏州)生物科技有限公司]，ImageQuant LAS 500型一体化成像仪(美国GE公司)。

    1.2 主要药品与试剂

    脑震宁颗粒(批号20200701)购自山西振东安特生物制药有限公司；吡拉西坦片(批号4201008，规格0.4 g)购自东北制药集团沈阳第一制药有限公司；异氟烷(批号20221102)购自深圳市瑞沃德生命科技有限公司；ATP含量检测试剂盒(批号20230329)购自南京建成生物工程研究所；电镜固定液、组织自发荧光淬灭剂、DAPI染色试剂(批号分别为G1102、G1221、G1012)均购自武汉赛维尔生物科技有限公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒、辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG抗体(批号分别为18C13B46、BST15D07AE54)均购自武汉博士德生物工程有限公司；十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶试剂盒(批号BB1207)购自陕西中晖赫彩生物医药科技有限公司；兔源过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator activated receptor gamma coactivator-1α ......