基于蛋白质组学探讨丹参饮对高脂血症模型大鼠血脂异常的调节机制Δ
1材料,1主要仪器与软件,2主要药品与试剂,3实验动物与饲料,2方法,1分组,造模与给药,2样本采集,3大鼠血脂水平检测,4大鼠肝脏组织病理形态学检测,5TMT定量蛋白质组学分析,6大鼠肝脏组织中
张玉昆,冯月男,卞敬琦,刘欣欣,肖洪彬,牛雯颖 (黑龙江中医药大学实验实训中心/黑龙江中医药大学教育部北药基础与应用研究重点实验室,哈尔滨 150040)高脂血症是一种体内脂质代谢紊乱性疾病,临床表现为血浆甘油三酯(triglyceride,TG)、胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)升高和高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)降低[1]。我国成年血脂异常者超过2亿人,是心脑血管病易发人群[1—2]。因此,对高脂血症的发病机制和治疗机制进行研究具有重要的社会意义。
丹参饮是治疗气滞血瘀证的经典方剂,具有活血化瘀、行气止痛之功。临床和基础实验研究发现,丹参饮加减服用月余可明显降低临床患者血清TG、TC水平,亦可显著降低高脂饲料和高脂乳剂诱导的高脂血症模型大鼠血浆TC、TG、LDL-C水平[3—4]。本课题组前期基础研究及以往多项研究均证实,丹参饮可以有效改善血脂水平[5—8]。高脂血症的发生、发展机制极为复杂,但是脂质代谢的相关酶、脂质转运的相关蛋白具有表达相对稳定、可被检测等特征,且肝脏是脂质代谢的重要器官。本研究拟通过对高脂血症模型大鼠肝脏进行蛋白质组学研究,从蛋白质表达谱角度解读丹参饮治疗高脂血症的靶点蛋白,以期明确丹参饮对高脂血症模型大鼠血脂异常的调节机制。
1 材料
1.1 主要仪器与软件
本研究使用的主要仪器与软件有:C18反相色谱柱、S-3500RS型色谱仪、Q-Exactive Plus型质谱仪、Vanquish Flex型二元超高效液相色谱(UPLC)仪、Xcalibur 4.0数据采集软件(美国Thermo Fisher Scientific公司),ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(美国Waters公司),TGL-16G型台式高速离心机(苏州捷美电子有限公司),7600-020型全自动生化分析仪(日本株式会社日立高新技术公司),BX43型光学显微镜(日本Olympus公司),LE204E型分析天平(瑞士Mettler Toledo公司),iMARK型酶标仪(美国Bio-Rad公司),DYY-7C型电泳仪、WD-9413B型凝胶成像分析系统、DYCZ-40D型转移槽(北京六一生物科技有限公司)。
1.2 主要药品与试剂
丹参饮水煎液由实验室自制 ......
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