类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种全身性免疫病，可导致患者多处关节肿胀、受损，甚至造成关节畸形，致残率较高。据统计，我国RA 的年发病率为0.34%～0.45%，患者人数超过500 万[1]。RA的发病机制尚不明确，但与多种细胞有关，其中巨噬细胞在病程进展过程中具有关键作用[2]。在炎症关节中，浸润的单核细胞处于缺氧环境，进而激活巨噬细胞，而这些被激活的巨噬细胞会高表达叶酸受体(folate receptor，FR)、清道夫受体等多种受体[3]。FR与叶酸(folic acid，FA)具有很强的亲和力，能介导巨噬细胞大量摄取FA，从而诱发RA[4]。因此，FR可作为靶向治疗RA的潜在靶点。

    雷公藤甲素(triptolide，TP)是从药用植物雷公藤中提取的环氧化二萜内酯化合物，具有抗炎症、抗类风湿、调节免疫、抑制血管增生及诱导细胞凋亡等作用，对RA具有一定的改善作用[5]。但TP存在水溶性差，肝、肾、生殖毒性较大，生物利用度低等不足，使得其临床应用严重受限[6]。可见，改进现有剂型有望成为实现TP减毒增效的重要策略。靶向聚合物纳米粒子能有效改善药物的溶解度、稳定性、生物利用度，并可延长药物在体内的循环时间，同时还能通过靶向治疗来减少药物的毒副作用[7]。聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolicacid)，PLGA]是一种生物相容性良好的可降解高分子聚合物，因其没有毒性，常被作为药物载体以制备纳米制剂，进而用于癌症、免疫系统疾病及心脑血管疾病等治疗领域[8]。聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)是一种具有良好生物相容性的聚合物，可显著延长纳米粒子的血液循环时间，增加药物在病灶部位的富集，被广泛用于生物制药领域[9]。FA具有分子生物相容性好、稳定性高、易于合成、无免疫原性等优点，现已成为一种极具应用前景的靶向配体[8]。考虑到FA与FR特异性结合这一特点，用FA修饰载药纳米粒子可有助于提高药物的靶向性、减少药物的毒副作用[10]。基于此，本研究拟采用乳化挥发法制备载TP靶向FR的聚合物纳米粒子(简称“TP@PLGA-PEG-FA”)，对其形态、粒径、电位进行表征，对其载药量及包封率进行测定，对其血液相容性和稳定性进行评价，并通过体外实验对该制剂的靶向性及对RA 的改善效果进行探讨，以期为TP 的深入开发和RA的临床治疗提供参考。

    1 材料

    1.1 主要仪器

    本研究所用主要仪器包括Galaxy-170s 型CO2培养箱和5424R 型离心机(德国Eppendorf 公司)、Cary-3500型紫外分光光度计(美国Agilent 公司)、Zetasizer Nano型激光粒度分析仪(英国Malvern 公司)、TS2 型倒置光学显微镜和FV3000 型激光共聚焦显微镜(日本Olympus公司)、TM3000 型扫描电子显微镜(日本Hitachi 公司)、168-1130 型酶标仪(美国Bio-Rad 公司)、CP214 型电子天平(美国Ohaus公司)等 ......