酶联免疫吸附试验一步法检测抗—HBc有关问题探讨
酶联免疫吸附试验(ELISA)是检测抗-HBc常用方法,根据反应模式可分为一步法和二分法。一步法是将待测样品和酶标记物同时加入到反应孔中进行反应,从而达到简便、快速的目的;两步法是先将样品加入到反应孔中,待反应结束后再加入酶标记物,从而使待测样品的“捕获反应”和酶标记物的“酶联反应”分开进行,因而反应更加稳定、重复性也更好,但反应时间比一步法长。目前国内用于检测抗-HBc的试剂盒多为ELISA一步法,在实际工作中,检测结果有临床意义,即标本用1:30盐水稀释后测定;有流行病学意义,即原血清不做稀释直接测定,其结果有很大差异,易出现假阴性或假阳性,尤其在临床上造成很大的困扰,现探讨如下;1 试剂
按说明书保存试剂盒,操作时从冰箱取出,放置于37℃环境恒温30分钟,使试剂温度恢复至37℃后再进行,因一步法反应时间为30分钟,试剂从冰箱取出恢复到反应温度需要时间,如果按常规放置至室温,反应时间达不到要求,抗原抗体反应不完全而可能出现假阴性 ......
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