刺五加钙调蛋白基因的克隆及内生真菌对其表达的影响(1)
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[摘要] 目的:克隆刺五加的钙调蛋白(calmodulin,CaM)基因,并分析内生真菌对其表达的影响。方法:采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends, RACE)技术克隆刺五加CaM基因的全长cDNA序列。通过RTPCR法检测可显著提高刺五加皂苷含量的内生真菌菌株P1161a,P1161b,P1094,P3121对CaM表达的影响。结果:刺五加CaM基因的cDNA全长为856 bp, 开放阅读框长450 bp,编码149 个氨基酸的蛋白,与人参Panax ginseng和胡萝卜Daucus carota等物种的CaM同源性均高达100%。RTPCR的结果显示,内生真菌可显著提高刺五加CaM基因的表达量(P<0.05),最大表达量出现在菌株P1094 回接90 d时,达对照的2.96倍。结论:首次克隆并报道了刺五加CaM的cDNA全长序列, 并证实内生真菌可显著提高刺五加CaM基因的表达量,为阐明内生真菌提高刺五加三萜皂苷含量的机制奠定了基础。
[关键词] 刺五加;钙调蛋白;克隆;表达分析
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30701086);河北省自然科学基金项目(C2009001252);河北省自然科学基金石药集团医药联合项目研究基金项目(H2012401006)
[通信作者] *邢朝斌,副教授,研究方向为分子生药学、药用植物细胞工程,Tel: (0315)3726238,Fax:(0315)3726341,Email: xingzhaobin@yahoocomcn 刺五加Eleutherococcus senticosus是我国传统的珍贵药用植物 ......
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