刺五加钙调蛋白基因的克隆及内生真菌对其表达的影响(1)
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[摘要] 目的：克隆刺五加的钙调蛋白(calmodulin，CaM)基因，并分析内生真菌对其表达的影响。方法：采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends， RACE)技术克隆刺五加CaM基因的全长cDNA序列。通过RTPCR法检测可显著提高刺五加皂苷含量的内生真菌菌株P1161a，P1161b，P1094，P3121对CaM表达的影响。结果：刺五加CaM基因的cDNA全长为856 bp， 开放阅读框长450 bp，编码149 个氨基酸的蛋白，与人参Panax ginseng和胡萝卜Daucus carota等物种的CaM同源性均高达100%。RTPCR的结果显示，内生真菌可显著提高刺五加CaM基因的表达量(P<0.05)，最大表达量出现在菌株P1094 回接90 d时，达对照的2.96倍。结论：首次克隆并报道了刺五加CaM的cDNA全长序列， 并证实内生真菌可显著提高刺五加CaM基因的表达量，为阐明内生真菌提高刺五加三萜皂苷含量的机制奠定了基础。
[关键词] 刺五加；钙调蛋白；克隆；表达分析
[基金项目] 国家自然科学基金项目(30701086)；河北省自然科学基金项目(C2009001252)；河北省自然科学基金石药集团医药联合项目研究基金项目(H2012401006)
[通信作者] *邢朝斌，副教授，研究方向为分子生药学、药用植物细胞工程，Tel： (0315)3726238，Fax：(0315)3726341，Email： xingzhaobin@yahoocomcn 刺五加Eleutherococcus senticosus是我国传统的珍贵药用植物 ......
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