3 结果与分析

    31 代谢物的指认

    甲醇水层通过衍生化反应得到氨基酸，有机酸和糖类，其典型总离子流色谱图见图1；而氯仿层经过甲酯化得到的均为非极性小分子和脂肪酸类化合物，其典型总离子流色谱图见图2。氨基酸的指认是结合NIST05数据库，再通过与对照品的保留时间和离子碎片对照而确定的，见图3。目标峰在样品色谱图中的保留时间与标品的保留时间一致，而且离子碎片情况也基本一致，故确定其为天冬酰胺。其余色谱峰的结构指认方法同上，共指认出氨基酸11个，有机酸8个，糖类5个，脂肪酸10个和甾醇类化合物2个，此外还包括香橙烯及其他的一些长链烷烃类低极性化合物。

    图5表明，散点图上可以看出极性部分各个组与采收期在X轴上均能明显分开，从Spslot载荷图(b)中可以得到每2组的差异代谢物。从图中可以得到，在发育初期的9月，其磷酸、甘油、苹果酸、柠檬酸、蔗糖和葡萄糖的含量较高，而发育中期的脯氨酸和赖氨酸的含量明显升高；3月款冬样品与采收期相比，开花后的脯氨酸、赖氨酸和蔗糖的含量降低，苹果酸、柠檬酸、果糖和葡萄糖的含量则呈升高的趋势。

    2个不同采集月份与传统采收期的款冬花蕾样品相比得到的多元统计分析结果见图6，散点图上可以看出非极性部分发育初期和开花后与采收期10—12月份在X轴上均能明显分开 ......