[摘要] 目的：分析甘草鲨烯合酶(squalene synthase，SQS)基因多态性及其对编码酶催化效率的影响，为揭示优质甘草形成的分子机制奠定基础。方法：提取甘草总RNA；PCR扩增其SQS基因编码序列；测序后分析SQS序列的多态性；将具有明显差异的4个甘草SQS序列(SQS1C，SQS1F，SQS2A，SQS2B)连入表达载体pET-32a(+)，转化大肠杆菌BL21；IPTG诱导蛋白表达，纯化后用于体外酶促反应；GC-MS鉴定产物并比较相对含量。结果：甘草SQS1基因存在单核苷酸多态性(single nuclear polymorphisms，SNPs)、插入与缺失多态性(InDel)、选择性剪接(AS)多态性；SQS2基因只存在SNPs。氨基酸序列分析显示，SQS1非保守替换占53.94%，结构域中有2个位点突变；SQS2非保守替换占60%，结构域中有1个位点突变。在4种编码酶的体外酶促反应中，利用GC-MS均能检测到产物生成；SQS1F编码酶积累鲨烯的能力高于其他序列 ......