黔岭淫羊藿总黄酮类成分对去势雌性大鼠骨质疏松症的实验研究(2)
2.2 血清生化指标的测定 于末次给药后禁食16~18 h,0.8%戊巴比妥钠40 mg·kg-1麻醉,腹主动脉取血,3 000 r·min-1离心20 min制备血清,放射免疫法测定甲状旁腺激素(PTH)、I型前胶原N末端前肽(PINP)含量;全自动生化分析仪测定碱性磷酸酶(ALP)、钙(Ca)、磷(P)含量。2.3 骨计量学指标的测定 取左侧股骨和腰椎,骨密度测定仪进行骨密度检测后,置烤箱中60 ℃过夜,电子分析天平称其干重。再置干燥的器皿内在马氏炉中800 ℃煅烧6 h,关炉,待其冷却后,电子分析天平称其质量得灰重,计算灰重/干重百分比=灰重/干重×100%。取此骨灰用原子发射光谱法进行骨钙磷含量的测定。
2.4 骨组织形态学观察 取右侧股骨,脱钙后切片行HE染色,采集镜下组织图像(放大倍数分别为40倍和100倍),使用MiE显微图像分析软件对组织图片进行图像分析。每只鼠观察HE染色切片各1张,包括股骨的骨干和干骺端组织各1块,骨干的参数测量取低倍视野(40倍);干骺端的参数测量取高倍视野(100倍),测定区域限定在距骺板下1 cm外的干骺端,每个标本测定面积为16 mm2 ......
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