2.4 β-catenin 蛋白水平检测 采用Western blot法检测食管组织β-catenin蛋白水平。组织裂解后提取总蛋白，BCA法进行蛋白定量，各组取等量蛋白经SDS-PAGE(分离胶10%，浓缩胶3%)分离后，转移到PVDF膜上；TBST脱脂奶粉封闭液(5%脱脂奶粉)室温封闭2 h，兔多克隆β-catenin抗体(1∶500)和兔多克隆GAPDH抗体(1∶1 000)4 ℃孵育过夜，再与山羊抗兔IgG 抗体(1∶2 000)37 ℃孵育1 h，ECL法压片曝光，使用Gel-Pro Analyzer 4.0软件分析各组食管组织β-catenin蛋白水平。

    2.5 统计分析 数据均采用±s表示，用SPSS 13.0统计软件进行分析，多组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA)，组间两两比较采用最小显著性差异法(LSD法)。

    3 结果

    3.1 一般情况观察 对照组大鼠体重增长较迅速。其余各组大鼠在诱变初始2周内体重略有减轻，至第3周开始体重缓慢增加，随着MBNA暴露次数和累积剂量的增加，体重增速逐渐变慢，体重较对照组显著降低(P<0.01)。膈下逐瘀汤高、低剂量组与模型组比较体重的变化基本一致。实验过程中，对照组大鼠皮毛柔顺，有光泽，对外界刺激反应较灵敏，其余各组大鼠逐渐出现活动减少，食量下降，耸毛，毛色无光泽、易脱落 ......