黄芪甲苷的生物样品稳定性考察及在大鼠体外肠菌中代谢转化研究(2)
2.4 AST在大鼠肝匀浆中的代谢2.4.1 NADPH启动系统制备 精密称取NADPNa2, G-6-P-Na, G-6-PDH和MgCl2适量,加水溶解并定容,体系含有2 mmol·L-1 NADPNa2,40 mmol·L-1 G-6-P-Na,4 U·L-1 G-6-PDH,40 mmol·L-1 MgCl2,-20 ℃保存。
2.4.2 样品制备 参照文献[7]法制备大鼠肝匀浆。首先在EP管中加入适量的AST甲醇溶液,水浴挥干溶剂,加入Tris缓冲溶液,大鼠肝匀浆,涡旋混匀。恒温振荡水槽37 ℃预温孵5 min。加入NADPH启动系统200 μL,涡旋混合均匀以启动反应。反应终体积为400 μL,含1.0 mmol·L-1NADPNa2, 20 mmol·L-1G-6-P-Na ......
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