五指那藤三萜类化学成分研究(1)
[摘要] 采用溶剂法、硅胶柱色谱、ODS柱色谱和HPLC等手段对五指那藤Stauntonia obovatifoliola subsp. intermedia茎中的化学成分进行分离纯化，并通过NMR，MS等谱学方法进行结构鉴定。从五指那藤茎的60%乙醇提取物中的乙酸乙酯、正丁醇萃取部位中分离得到19个化合物，分别为羽扇豆醇(1)、白桦酮酸(2)、白桦脂酸(3)、3-表-白桦脂酸(4)、木通种酸(5)、24-O-乙酰木通种酸(6)、3-O-α-L-阿拉伯糖基-30-去甲常春藤皂苷元-28-O-α-L-鼠李糖基(1→4)-β-D-葡萄糖基(1→6)-O-β-D-葡萄糖基酯(7)、Stauntoside A(8)、刺楸皂苷A(9)、刺楸皂苷J(10)、Kizuta saponin K10(11)、3-O-α-L-鼠李糖基(1→2)-O-α-L-阿拉伯糖基常春藤皂苷元-28-β-D-木糖基(1→6)-O-β-D-葡萄糖基酯(12)、刺楸皂苷B(13)、3-O-α-L-鼠李糖基(1→2)-O-α-L-阿拉伯糖基-常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖基(1→6)-O-β-D-葡萄糖基酯(14)、sieboldianoside A(15)、septemoside A(16)、刺楸皂苷K(17)、刺楸皂苷 Ⅰ(18)、3-O-α-L-阿拉伯糖基(1→2)-O-β-D-葡萄糖醛酸基-常春藤皂苷元(19)。其中4，6，10，12，14，16～19为首次从该属植物中分得，且6为新的天然产物。
, http://www.100md.com
[关键词] 五指那藤;化学成分;三萜
[收稿日期] 2014-06-24
[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项(2009ZX09301-005)子课题(2009ZX09301-005-004)
[通信作者] *龚慕辛，教授，Tel：(010)83911632，E-mail：gongmuxin@126.com;*王智民，研究员，E-mail：zhmw123@263.net
[作者简介] 卢旭然，博士研究生，E-mail：luxuran1986@163.com
五指那藤Stauntonia obovatifoliola Hayata subsp. intermedia为木通科Lardizabalaceae Hayata subsp. intermedia野木瓜属Stauntonia木质藤本植物，主产于我国广东、广西、湖南省[1]。为广西民间习用药材，在瑶药里有“白九牛”之称，主要治疗风湿痛、肾炎水肿、尿血等证[2]。在壮药里，被称作“那藤”，其茎、叶能祛风止痛，舒筋活络，用于风湿骨痛，跌打损伤和水肿，果实用于疝气[3]。关于五指那藤的研究报道并不多见，但其同属植物野木瓜S. chinensis DC.研究较多。野木瓜属植物的化学成分包含五环三萜及其苷类、去甲五环三萜及其苷类、木脂素类、黄酮类、酚类等，以三萜苷类成分为主[4]。本文对五指那藤60%乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇可溶部分进行了化学成分研究。从该植物中分离纯化得到19个三萜类化合物，其中9种化合物为首次从该属植物中分离得到，且1种为新的天然产物。
, 百拇医药
1 材料
核磁用Bruker Avance II 500M核磁共振仪测定，以TMS为内标，质谱用Bruker microTOF和Bruker FT-ICR-MS solarix Maldi/ESI 9.4T质谱仪测定;柱色谱用硅胶(100～200目，200～300目)及薄层色谱用硅胶GF254和硅胶G均为青岛海洋化工厂产品。D101大孔树脂购自天津市海光化工有限公司。反相预制板(0.25 mm)购自Merk公司，HPLC为Shimadzu LC-20A，检测器为PDA。半制备柱为Agilent Eclipse XDB-C18(9.4 mm×250 mm，5 μm)。
五指那藤药材于2011年10月采自广西省隆安县，由广西壮族自治区药用植物研究所戴斌研究员鉴定为S.obovatifoliola Hayata subsp. intermedia的藤茎，样品保存在本实验室，编号为WZNT20111030。
, 百拇医药
2 提取与分离
取五指那藤14.8 kg，粉碎后加6倍量60%乙醇浸泡2 h。回流提取2次，每次4 h，滤液减压浓缩(60 ℃以下)回收乙醇至无醇味(约10 L)。依次用5倍量乙酸乙酯、正丁醇(水饱和)萃取5次，浓缩至浸膏，所得乙酸乙酯可溶部分275 g，正丁醇可溶部分600 g。
正丁醇可溶部位加水溶解，取上清液过D101大孔树脂柱，柱体积约为8 L，分别用30%，50%，70%乙醇和95%乙醇(各4倍柱体积)洗脱，所得30%乙醇部位52.8 g，50%乙醇部位371.3 g，70%乙醇部位104.9 g，95%乙醇部位16.6 g。
2.1 乙酸乙酯部位的分离 乙酸乙酯部位浸膏经硅胶柱分离，采用正己烷-乙酸乙酯 (100∶1～100∶2～100∶3～100∶5～100∶8～10∶1～8∶1～6∶1～4∶1)，二氯甲烷-丙酮(20∶1～10∶1～8∶1～6∶1～4∶1～2∶1)，二氯甲烷-甲醇(20∶1～10∶1～4∶1～0∶1)3种溶剂系统不同梯度依次洗脱，共得到120个流分。Fr. 21～22，Fr. 28～29，Fr. 34～37，经重结晶后分别得到化合物1(约60 mg)和2(约40 mg)。Fr. 11～12经硅胶柱以石油醚-乙酸乙酯(20∶1～10∶1)比例洗脱，得化合物6(约10 mg)。Fr. 41～42经硅胶柱以环己烷-乙酸乙酯(20∶1～10∶1)比例洗脱，得化合物3(约280 mg)。Fr. 70～72经硅胶柱以石油醚-丙酮(5∶1～5∶2～5∶3)比例洗脱，得化合物5(约60 mg)。Fr.90重结晶得到化合物4(约30 mg);Fr.115重结晶得化合物9(约650 mg)。, 百拇医药(卢旭然 刘烁 王满元 龚慕辛 王智民 陈筱清)
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[关键词] 五指那藤;化学成分;三萜
[收稿日期] 2014-06-24
[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项(2009ZX09301-005)子课题(2009ZX09301-005-004)
[通信作者] *龚慕辛，教授，Tel：(010)83911632，E-mail：gongmuxin@126.com;*王智民，研究员，E-mail：zhmw123@263.net
[作者简介] 卢旭然，博士研究生，E-mail：luxuran1986@163.com
五指那藤Stauntonia obovatifoliola Hayata subsp. intermedia为木通科Lardizabalaceae Hayata subsp. intermedia野木瓜属Stauntonia木质藤本植物，主产于我国广东、广西、湖南省[1]。为广西民间习用药材，在瑶药里有“白九牛”之称，主要治疗风湿痛、肾炎水肿、尿血等证[2]。在壮药里，被称作“那藤”，其茎、叶能祛风止痛，舒筋活络，用于风湿骨痛，跌打损伤和水肿，果实用于疝气[3]。关于五指那藤的研究报道并不多见，但其同属植物野木瓜S. chinensis DC.研究较多。野木瓜属植物的化学成分包含五环三萜及其苷类、去甲五环三萜及其苷类、木脂素类、黄酮类、酚类等，以三萜苷类成分为主[4]。本文对五指那藤60%乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇可溶部分进行了化学成分研究。从该植物中分离纯化得到19个三萜类化合物，其中9种化合物为首次从该属植物中分离得到，且1种为新的天然产物。
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1 材料
核磁用Bruker Avance II 500M核磁共振仪测定，以TMS为内标，质谱用Bruker microTOF和Bruker FT-ICR-MS solarix Maldi/ESI 9.4T质谱仪测定;柱色谱用硅胶(100～200目，200～300目)及薄层色谱用硅胶GF254和硅胶G均为青岛海洋化工厂产品。D101大孔树脂购自天津市海光化工有限公司。反相预制板(0.25 mm)购自Merk公司，HPLC为Shimadzu LC-20A，检测器为PDA。半制备柱为Agilent Eclipse XDB-C18(9.4 mm×250 mm，5 μm)。
五指那藤药材于2011年10月采自广西省隆安县，由广西壮族自治区药用植物研究所戴斌研究员鉴定为S.obovatifoliola Hayata subsp. intermedia的藤茎，样品保存在本实验室，编号为WZNT20111030。
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2 提取与分离
取五指那藤14.8 kg，粉碎后加6倍量60%乙醇浸泡2 h。回流提取2次，每次4 h，滤液减压浓缩(60 ℃以下)回收乙醇至无醇味(约10 L)。依次用5倍量乙酸乙酯、正丁醇(水饱和)萃取5次，浓缩至浸膏，所得乙酸乙酯可溶部分275 g，正丁醇可溶部分600 g。
正丁醇可溶部位加水溶解，取上清液过D101大孔树脂柱，柱体积约为8 L，分别用30%，50%，70%乙醇和95%乙醇(各4倍柱体积)洗脱，所得30%乙醇部位52.8 g，50%乙醇部位371.3 g，70%乙醇部位104.9 g，95%乙醇部位16.6 g。
2.1 乙酸乙酯部位的分离 乙酸乙酯部位浸膏经硅胶柱分离，采用正己烷-乙酸乙酯 (100∶1～100∶2～100∶3～100∶5～100∶8～10∶1～8∶1～6∶1～4∶1)，二氯甲烷-丙酮(20∶1～10∶1～8∶1～6∶1～4∶1～2∶1)，二氯甲烷-甲醇(20∶1～10∶1～4∶1～0∶1)3种溶剂系统不同梯度依次洗脱，共得到120个流分。Fr. 21～22，Fr. 28～29，Fr. 34～37，经重结晶后分别得到化合物1(约60 mg)和2(约40 mg)。Fr. 11～12经硅胶柱以石油醚-乙酸乙酯(20∶1～10∶1)比例洗脱，得化合物6(约10 mg)。Fr. 41～42经硅胶柱以环己烷-乙酸乙酯(20∶1～10∶1)比例洗脱，得化合物3(约280 mg)。Fr. 70～72经硅胶柱以石油醚-丙酮(5∶1～5∶2～5∶3)比例洗脱，得化合物5(约60 mg)。Fr.90重结晶得到化合物4(约30 mg);Fr.115重结晶得化合物9(约650 mg)。, 百拇医药(卢旭然 刘烁 王满元 龚慕辛 王智民 陈筱清)