2.4 雷公藤AACT基因的表达分析 雷公藤悬浮细胞经过黑暗条件下悬浮培养10 d后，茉莉酸甲酯(MeJA)作为诱导子处理悬浮细胞，使其终浓度为50 μmol·L^-1，利用荧光定量PCR检测TwAACT基因经过不同处理时间(0，1，4，12，24，48，72 h)的表达情况。

    采用CTAB法提取各时间点总RNA，利用FastQuant RT Kit试剂盒(天根)反转成cDNA，选取雷公藤β-actin作为内参基因，设计引物如下：β-actin F：5′-AGGAACCACCGATCCAGACA-3′，β-Actin R：5′-GGTGCCCTGAGGTCCTGTT-3′，RT-AACT F：5′-CGCCTATGGGTGGATTTCT-3′，RT-AACT R：5′-CTGTGCTGCGAGCGTTGT-3′。实时荧光定量反应体系：10 μL SYBR green(2×)，0.4 μL ROX High(5×) ......