花叶型与艾叶型乌头叶片基因组DNA甲基化修饰的MSAP分析(1)

http://www.100md.com 2016年10月1日 《中国中药杂志》2016年第19期

     [摘要] 建立乌头叶片DNA甲基化MSAP分析方法，并对不同形状的乌头叶片DNA甲基化修饰位点进行MSAP分析。以花叶型、艾叶型乌头不同部位叶片为实验材料，考察乌头叶片MSAP双酶切反应时间，筛选适宜的选择性扩增引物，并通过计算6%丙烯酰胺凝胶电泳图泳道和条带统计分析叶片甲基化修饰差异。结果150 ng乌头叶片DNA MSAP双酶切反应体系在37 ℃条件下，酶切16 h较充分；使用25对筛选出的适宜性引物进行乌头基因组的MSAP选择性扩增，总共获得273个电泳条带，其中无甲基化或单链内甲基化228条，双链内甲基化条带27条，单链外甲基化条带18条，总甲基化率达16.48%；花叶型与艾叶型乌头总甲基化率稍有差异，分别为15.36%，14.34%，并各自获得8条、6条基因组甲基化修饰差异的核苷酸片段，占其总条带数的3.00%，2.26%。通过研究可为乌头植株的分子鉴定、良种选育与栽培，以及乌头的遗传演化等提供新思路。

    [关键词] 乌头； 叶型； 甲基化敏感性扩增多态性

    乌头Aconitum carmichaeli Debx.为毛茛科乌头属植物 ......