2方法

    21细胞培养U87MG细胞培养于添加了10%胎牛血清的DMEM培养基中，置于37 ℃恒温、5%CO2培养箱中饱和湿度的条件下培养。稳定传2～3代后，选择处于对数生长期细胞用于后续实验。

    22建立裸鼠皮下移植瘤模型在裸鼠左上肢腋下缓慢推注注射02 mL U87MG细胞混悬液，含2×106个细胞。定期观测裸鼠成瘤的时间和瘤体积大小。肿瘤的体积用游标卡尺测量肿瘤的最长径(a)及最短径(b)，并根据公式V= ab2/2进行计算。成瘤后，给予中药单体1 mg·kg-1腹腔注射14 d，取瘤称重，免疫组化检测Ki67。

    23MTT法考察知母皂苷AⅢ对U87MG脑胶质瘤细胞增殖能力的影响U87MG细胞悬液调节成密度为5×104个/mL，每孔接种100 μL于96孔板中，在CO2培养箱中过夜。为考察知母皂苷AⅢ对U87MG细胞增殖能力的影响，预试验中设置24，48，72 h时间点，数据差异不大(未显示)，最终选择24 h为MTT检测时间。知母皂苷AⅢ于125，25 ......