苦豆子遗传转化体系建立及SaLDC启动子缺失分析(2)

http://www.100md.com 2017年5月15日 《中国中药杂志》2017年第10期

     在植物遗传转化过程中，GUS瞬时表达常被用于快速确定和优化各种影响转化效率的因素，继而建立高效遗传转化体系[12]。启动子在基因转录起始和转录频率的调控中有决定性作用，可以控制结构基因的表达起始时间和表达程度的强弱[13]，启动子缺失分析是研究启动子及其调控元件功能的一种重要且有效的方法[14]。邵克强等[15]通过5′端缺失系统研究了水稻Pib启动子中分子元件YTCANTYY的拷贝数与启动子启动活性和暗诱导性的关系。Ren等[16]通过对水稻OsMT2b启动子的缺失分析明确该启动子从-21～-212是最短的活性区域。本研究在已有苦豆子再生体系的基础上，研究影响其遗传转化效率的各种因素，构建SaLDC不同启动子缺失片段与报告基因GUS的重组表达载体，探讨不同启动子缺失片段在苦豆子愈伤组织中的瞬时表达水平，以期对苦豆子SaLDC启动子的功能进行系统研究，为启动子的顺式作用元件与相关转录因子的互作研究提供依据，也为今后详细研究SaLDC在OMA生物合成途径中的地位奠定基础。

    1 材料

    苦豆子植株由宁夏大学农学院李晓伟副教授鉴定为S. alopecuroides ......