4′—去甲基表鬼臼毒素的酶法糖基化(2)
1 材料
1.1 植物 库拉索芦荟A. barbadensis由中央民族大学生命与环境科学学院杨林副教授鉴定。
1.2 菌株 实验使用Escherichia coli Trans1-T1克隆宿主与E. coli Transetta (DE3)表达宿主购自北京全式金生物技术有限公司。
1.3 仪器与试剂 Agilent 1200高效液相色谱仪购自美国安捷伦科技有限公司；LCQ Fleet离子阱质谱仪购自美国热电公司；核磁共振波谱仪型号为Mercury-400及VNS-600(Varian，USA)；分析色谱柱为Shiseido capcellpak C18 MG III column (4.6 mm×250 mm，5 μm，Shiseido Co.，Ltd.，Japan)；半制备色谱柱为YMC-pack ODS-A column(4.6 mm×250 mm，5 μm，YMC，Japan)。RNA提取试剂盒、琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒、质粒提取试剂盒购自江苏康为世纪生物科技有限公司；TransScript II First-Strand cDNA Synthesis SuperMix逆转录试剂盒购自北京全式金生物技术有限公司；E-fusion cloning kit购自淮安百慧生物科技有限公司；pET28a表达载体为Novagen公司产品；内切酶购自宝生物(大连)有限公司；镍柱亲和色谱填料(Ni SepharoseTM 6 Fast Flow)为美国GE公司产品；4′-去甲基表鬼臼毒素(1)购自大连美仑生物技术有限公司；尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate glucose ......
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1.1 植物 库拉索芦荟A. barbadensis由中央民族大学生命与环境科学学院杨林副教授鉴定。
1.2 菌株 实验使用Escherichia coli Trans1-T1克隆宿主与E. coli Transetta (DE3)表达宿主购自北京全式金生物技术有限公司。
1.3 仪器与试剂 Agilent 1200高效液相色谱仪购自美国安捷伦科技有限公司；LCQ Fleet离子阱质谱仪购自美国热电公司；核磁共振波谱仪型号为Mercury-400及VNS-600(Varian，USA)；分析色谱柱为Shiseido capcellpak C18 MG III column (4.6 mm×250 mm，5 μm，Shiseido Co.，Ltd.，Japan)；半制备色谱柱为YMC-pack ODS-A column(4.6 mm×250 mm，5 μm，YMC，Japan)。RNA提取试剂盒、琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒、质粒提取试剂盒购自江苏康为世纪生物科技有限公司；TransScript II First-Strand cDNA Synthesis SuperMix逆转录试剂盒购自北京全式金生物技术有限公司；E-fusion cloning kit购自淮安百慧生物科技有限公司；pET28a表达载体为Novagen公司产品；内切酶购自宝生物(大连)有限公司；镍柱亲和色谱填料(Ni SepharoseTM 6 Fast Flow)为美国GE公司产品；4′-去甲基表鬼臼毒素(1)购自大连美仑生物技术有限公司；尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate glucose ......
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