番荔枝内酯类化合物基于耐阿霉素肝癌细胞SMMC—7721/ADR的构效关系研究(1)
[摘要] 研究12种番荔枝内酯类化合物对耐阿霉素肝癌细胞SMMC-7721/ADR的作用，并初步探究其构效关系。实验利用实时荧光定量PCR法检测12种番荔枝内酯类化合物：annosquamin A(1)，annosquamin B(2)，annotemoyin-1(3)，uvariamicin Ⅱ(4)，annosquacin D(5)，annosquacin B(6)，isodesacetyluvaricin(7)，uvarigrandin A(8)，squamostatin D(9)，squamostatin E(10)，squamostatin A(11)，12，15-cis-squamostatin A(12)对SMMC-7721/ADR细胞中相关基因NDUFV2的表达量。该研究发现所有受试化合物均使SMMC-7721/ADR中NDUFV2表达量有所下调，邻双四氢呋喃环型番荔枝内酯活性最强，而间双四氢呋喃环型番荔枝内酯活性最弱。内酯环与邻近的四氢呋喃环间碳数越少，作用越强；对于邻双四氢呋喃型番荔枝内酯化合物，链上含有的羟基个数越多，化合物作用可能越强；对于间双四氢呋喃型番荔枝内酯化合物，链上含有的羟基个数越少，化合物作用可能越强；且受试化合物中均是含有3个羟基取代的化合物作用较强；相对构型为苏式的番荔枝内酯的作用比赤式的强，四氢呋喃环为顺式构型的番荔枝内酯的作用比反式的强；在其他基团完全相同的情况下，长链烷基端部与邻近的四氢呋喃环之间的碳数越少，作用越强。
, 百拇医药
[关键词] 番荔枝内酯；多药耐药；SMMC-7721/ADR；构效关系
[Abstract] The present research was launched to investigate the effects of 12 annonaceous acetogenins (ACGs) on human hepatic carcinoma cell line SMMC-7721/ADR， and to find out their structure-activity relationship. SMMC-7721/ADR cells were treated with 12 ACGs including annosquamin A(1)，annosquamin B(2)，annotemoyin-1(3)，uvariamicin Ⅱ(4)，annosquacin D(5)，annosquacin B(6)，isodesacetyluvaricin(7)，uvarigrandin A(8)，squamostatin D(9)，squamostatin E(10)，squamostatin A(11)，and 12，15-cis-squamostatin A(12) for 24 h， and the different expression of the target gene NDUFV2 were detected by quantitative real-time PCR. All the tested compounds made the expression of the target gene NDUFV2 decreased on human hepatic carcinoma cell line SMMC-7721/ADR， of which the bistetrahydrofuran ACGs showed the best activity，which the non-adjacent bistetrahydrofuran ACGs displayed the worst activity.The ACGs with the reducing number of carbons between γ-unsaturated lactone and the close tetrahydrofuran (THF) ring are more potent. For bistetrahydrofuran ACGs with the same nucleus skeleton，they would be more active as more hydroxyls on aliphatic chain， which for the non-adjacent bistetrahydrofuran ACGs with less hydroxyls on aliphatic chain that would be more active. ACGs with 3 hydroxyls on aliphatic chain would be more active. ACGs with threo configuration are more active than erythro configurotion， and the compounds with cis THF ring seem to be superior to those of trans THF ring. Furthermore， the ACGs with the reducing number of carbons between terminal methyl and the close tetrahydrofuran (THF) ring are more potent.
, 百拇医药
[Key words] annonaceous acetogenins；multidrug resistance；SMMC-7721/ADR；structure-activity relationship
番荔枝Annona squamosal L.为番荔枝科Annonaceae番荔枝属Annona植物，广泛分布于热带及亚热带地区，我国的广东、广西、云南及海南等南方多数城市均有栽培[1]，据《中华本草》[2]记载：番荔枝科番荔枝属植物番荔枝的干燥成熟种子，性味苦、寒，归心、肺、肝、肾、脾经，其功效為消积杀虫、清热解毒、解郁、止血。番荔枝内酯是从番荔枝科植物中提取分离得到的一类长链内酯类化合物，其基本化学结构为35～37个碳原子构成的化合物骨架，分子中含0～3个四氢呋喃环(tetrahydrofuran，THF)，末端有1个甲基取代或经重排的γ-内酯环和2条连接这些部分的长烷基直链，在碳链上还常常带有一些立体化学多变的含氧官能团(羟基、酮基、乙酰氧基、环氧结构等)或者双键[3-6]。目前，已有文献报道，番荔枝内酯具有显著的抗肿瘤作用，尤其是对抑制多药耐药肿瘤细胞的生长[7]表现出强烈的活性。对线粒体的强效抑制作用[8]，从而诱导肿瘤细胞凋亡[9]，杀死肿瘤细胞为其作用机制。本实验前期采用体外线粒体复合酶Ⅰ活性测试、计算机模拟分子对接两种方法，以AGGs对线粒体复合酶Ⅰ的NDUFV2亚基模拟对接，发现AGGs能够与线粒体复合酶Ⅰ的NDUFV2亚基结合位点进行很好结合，为进一步验证AGGs对该亚基的作用，结合番荔枝内酯立体结构的复杂性，其构效关系研究[10]已经成为现代研究的一大热点，本实验选用实验室前期分离得到的 12个番荔枝内酯类化合物，选用实时荧光定量PCR法，主要考察结构中γ-内酯环两环间与邻近的四氢呋喃环的碳数、羟基个数、四氢呋喃环及相邻羟基的构型、长链烷基端部与邻近的四氢呋喃环之间的碳数等因素对SMMC-7721/ADR上目的基因NDUFV2的作用之间的关系，以期进一步探索番荔枝内酯对抗肿瘤作用的机制，并为临床治疗找到一种具有高活性抗多药耐药性肿瘤的化合物结构模型。, 百拇医药(王绪楠 李祥 陈勇 李月)
, 百拇医药
[关键词] 番荔枝内酯；多药耐药；SMMC-7721/ADR；构效关系
[Abstract] The present research was launched to investigate the effects of 12 annonaceous acetogenins (ACGs) on human hepatic carcinoma cell line SMMC-7721/ADR， and to find out their structure-activity relationship. SMMC-7721/ADR cells were treated with 12 ACGs including annosquamin A(1)，annosquamin B(2)，annotemoyin-1(3)，uvariamicin Ⅱ(4)，annosquacin D(5)，annosquacin B(6)，isodesacetyluvaricin(7)，uvarigrandin A(8)，squamostatin D(9)，squamostatin E(10)，squamostatin A(11)，and 12，15-cis-squamostatin A(12) for 24 h， and the different expression of the target gene NDUFV2 were detected by quantitative real-time PCR. All the tested compounds made the expression of the target gene NDUFV2 decreased on human hepatic carcinoma cell line SMMC-7721/ADR， of which the bistetrahydrofuran ACGs showed the best activity，which the non-adjacent bistetrahydrofuran ACGs displayed the worst activity.The ACGs with the reducing number of carbons between γ-unsaturated lactone and the close tetrahydrofuran (THF) ring are more potent. For bistetrahydrofuran ACGs with the same nucleus skeleton，they would be more active as more hydroxyls on aliphatic chain， which for the non-adjacent bistetrahydrofuran ACGs with less hydroxyls on aliphatic chain that would be more active. ACGs with 3 hydroxyls on aliphatic chain would be more active. ACGs with threo configuration are more active than erythro configurotion， and the compounds with cis THF ring seem to be superior to those of trans THF ring. Furthermore， the ACGs with the reducing number of carbons between terminal methyl and the close tetrahydrofuran (THF) ring are more potent.
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[Key words] annonaceous acetogenins；multidrug resistance；SMMC-7721/ADR；structure-activity relationship
番荔枝Annona squamosal L.为番荔枝科Annonaceae番荔枝属Annona植物，广泛分布于热带及亚热带地区，我国的广东、广西、云南及海南等南方多数城市均有栽培[1]，据《中华本草》[2]记载：番荔枝科番荔枝属植物番荔枝的干燥成熟种子，性味苦、寒，归心、肺、肝、肾、脾经，其功效為消积杀虫、清热解毒、解郁、止血。番荔枝内酯是从番荔枝科植物中提取分离得到的一类长链内酯类化合物，其基本化学结构为35～37个碳原子构成的化合物骨架，分子中含0～3个四氢呋喃环(tetrahydrofuran，THF)，末端有1个甲基取代或经重排的γ-内酯环和2条连接这些部分的长烷基直链，在碳链上还常常带有一些立体化学多变的含氧官能团(羟基、酮基、乙酰氧基、环氧结构等)或者双键[3-6]。目前，已有文献报道，番荔枝内酯具有显著的抗肿瘤作用，尤其是对抑制多药耐药肿瘤细胞的生长[7]表现出强烈的活性。对线粒体的强效抑制作用[8]，从而诱导肿瘤细胞凋亡[9]，杀死肿瘤细胞为其作用机制。本实验前期采用体外线粒体复合酶Ⅰ活性测试、计算机模拟分子对接两种方法，以AGGs对线粒体复合酶Ⅰ的NDUFV2亚基模拟对接，发现AGGs能够与线粒体复合酶Ⅰ的NDUFV2亚基结合位点进行很好结合，为进一步验证AGGs对该亚基的作用，结合番荔枝内酯立体结构的复杂性，其构效关系研究[10]已经成为现代研究的一大热点，本实验选用实验室前期分离得到的 12个番荔枝内酯类化合物，选用实时荧光定量PCR法，主要考察结构中γ-内酯环两环间与邻近的四氢呋喃环的碳数、羟基个数、四氢呋喃环及相邻羟基的构型、长链烷基端部与邻近的四氢呋喃环之间的碳数等因素对SMMC-7721/ADR上目的基因NDUFV2的作用之间的关系，以期进一步探索番荔枝内酯对抗肿瘤作用的机制，并为临床治疗找到一种具有高活性抗多药耐药性肿瘤的化合物结构模型。, 百拇医药(王绪楠 李祥 陈勇 李月)