新生大鼠海马神经干细胞的培养与传代(1)

http://www.100md.com 2014年6月1日 药物与人2014年第6期

     作者简介：沈栋林(1973、3-) 男 ，硕士，副主任医师，研究方向：儿童神经系统疾病；李同欢，男，主治医师，遵义医学院附属医院；

    通讯作者：束晓梅，女，教授，遵义医学院附属医院

    摘要：

    目的：探讨新生大鼠海马神经干细胞(Neural Stem Cells， NSCs)体外分离培养的条件和传代的新方法。方法：从新生大鼠海马中分离神经干细胞，采用无血清培养技术，在表皮生长因子(epidermal growth factor， EGF)、碱性成纤维生长因子( basic fibroblast growth factor， bFGF)和B27联合作用下使其不断增殖克隆，采用神经小球分离试剂盒进行传代，利用免疫荧光染色的方法对培养的细胞进行鉴定。结果：从新生大鼠海马分离的细胞群可不断增殖形成细胞克隆球，并能稳定传代，呈nestin阳性表达，且具有多向分化能力。采用神经小球分离试剂盒传代的细胞球生长快，数量多，体积大，折光性好。结论：利用无血清技术和特定生长因子，可以使来源于新生大鼠海马的NSCs在体外扩增，利用大鼠神经小球分离试剂盒可以有效地进行传代 ......