干细胞中支原体PCR检测方法的建立(1)
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摘要：目的：为了更好的检测干细胞中支原体污染的情况。方法：以本实验室2013年12月-2014年4月间培养的干细胞56份为研究对象，使用PCR方法对干细胞中的支原体污染情况进行检测，并使用支原体检测试剂盒进行对比检测，统计检测干细胞中支原体污染的情况及种类。比较PCR检测方法与支原体检测试剂盒的准确性及特异性。结果： PCR检测阳性例数为21例，试剂盒检测阳性例数为12例，而阳性率分别为37.5%和21.4%。两组间阳性例数和阳性率比较结果差异显著(p<0.05)。复苏的干细胞连续144小时之后，无论是PCR检测还是试剂盒检测，支原体的阳性例数和阳性率均高于72小时、48小时和24小时。而且在培养培养24小时或144小时之后，PCR检测和试剂盒检测干细胞支原体污染的阳性例数和阳性率情况比较结果差异显著(p<0.05)。而培养48小时和72小时之后，PCR检测和试剂盒检测干细胞支原体污染的阳性例数和阳性率情况比较结果差异不显著(p>0.05)。结论：PCR检测方法较支原体试剂盒检测方法具有更高的准确率和敏感性。
关键词：支原体；干细胞；PCR检测
【中图分类号】
R249 【文献标识码】B 【文章编号】1002-3763(2014)07-0029-01
近些年，干细胞对治疗如糖尿病、神经退行性疾病及骨关节疾病等疾病均有良好的应用评价，并且很多研究人员和普通人希望干细胞能在更多的疾病治疗领域发挥更为广阔的应用价值。人胚胎干细胞(hESCs， human embryonic stem cells)因其具有无限增殖能力和多向分化潜能而被作为研究干细胞的常用细胞类型[1，2]。细胞出现支原体污染是实验室中比较常见的现象，感染率一般为5-30%[3] ......
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