对铜绿假单胞菌的联合用药研究(2)
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参见附件。
1.2.2方法:取分离纯化铜绿假单胞菌稀释至1.5×106 cfu/ml。将头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、环丙沙星、依诺沙星以灭菌M-H肉汤倍比稀释成256、128、64、32、…、0.063 μg/ml等系列浓度。再将倍比稀释的不同浓度的两种抗菌药物按棋盘法设计,环丙沙星、依诺沙星分别与头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南,阿米卡星与头孢他啶两两组合加入96孔平板中,每种抗菌药物取50 μl,再将1.5×106 cfu/ml的菌液100 μl加入孔中,37 ℃过夜培养,观察结果。记录单独应用两药的MIC,并选择最佳组合效应时两药联合时各自的MIC,以计算FIC指数。FIC≤0.5,为协同作用;0.5
1.3统计学处理:耐药性诊断标准按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)标准。数据统计分析采用WHONET 5.3软件进行。试验中各组间率的比较用SPSS 11.5统计软件行χ2检验。
2结果
2.1细菌学调查结果:两年间共分离出356株细菌,检出的细菌中革兰阴性杆菌259株,占72.7%,革兰阳性球菌97株,占27.3%。其中铜绿假单胞菌62株(2009年分离39株),肺炎克雷伯氏菌51株,鲍曼不动杆菌48株,表皮葡萄球菌39株(其中MRSE16株),大肠埃希菌34株,金黄色葡萄球菌35株(其中MRSA 18株),阴沟肠杆菌28株,肠球菌25株,弗氏柠檬酸杆菌11株,奇异变形菌6株,腐生葡萄球菌7株,B群链球菌3株。
2.239株铜绿假单胞菌对7种抗生素的敏感性:对头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、环丙沙星、依诺沙星、阿米卡星敏感率分别为75.75%、84.85%、57.58%、63.64%、63.64%、48.49%和75.75%。MIC50分别为4、8、4、4、1、4、8 mg/L,MIC90分别为32、32、16、16、4、16、64 mg/L。
2.3环丙沙星、依诺沙星联合头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南的抑菌效果:各种抗菌药物的联合抑菌效果见表1和表2。从表1可见,环丙沙星组发生协同的比率大于依诺沙星组,统计数据表明,二者差异无统计学意义(P>0.05)。按耐药特征分组后的体外联合效应的比较情况,39株铜绿假单胞菌分为A组13株,B组10株,C组16株,从表2可见,随着细菌对抗菌药物耐药的种类增多,则发生协同的比率减少,相加作用增高。
表1环丙沙星、依诺沙星联合4种β-内酰胺类抗菌药物
对39株铜绿假单胞菌的体外联合效应(株数/比率)
药物环丙沙星依诺沙星协同相加无关拮抗协同相加无关拮抗头孢他啶14/35 ......
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