标本溶血或混入红细胞对癌胚抗原检测结果的影响
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癌胚抗原(CEA)是人体多脏器癌症的广谱肿瘤标记物,临床上常作为肿瘤患者的筛查、良性与恶性肿瘤鉴别、肿瘤术后疗效观察的指标之一。ELISA一步法检测CEA具有快速简便、特异性强、灵敏度高等优点,在临床广泛应用。但在实验工作中,由于抽血离心或血清量不足等因素,产生溶血或带血球标本,对检测结果产生一定的影响。本文通过人为造成不同程度的溶血和带血球标本,观察其对ELISA一步法检测CEA结果的影响。
1 材料与方法
11 仪器与材料 (1)奥地利HT2全自动酶标仪;(2)拜耳全自动血球分析仪;(3)郑州博赛公司生产的CEA酶免疫检测试剂盒。
12 标本来源 留取30例经检测CEA阴性的血液标本。
13 标本处理方法 (1)溶血标本的制备:将15份标本每份分成4份,一份为空白,另三份用溶血血球在血球分析仪测量下,分别制成含20、10与5 g/L溶血成份的血液标本。(2)带血球标本的制备:将其余15份标本每份分成4份,一份为空白,另三份用血球在血球计数仪测量下,校正红细胞浓度为0.0625×1012/L、0.125×1012/L、0.25×1012/L。
2 结果
21 带血球标本的结果 红细胞浓度为0.0625×1012/L、0.125×1012/L与0.25×1012/L,CEA检测阳性例数分别为1,9与14,经与空白进行χ2检验,P值分别>0.05、<0.01与<0.01。
22 溶血标本的结果 5 g/L、10 g/L与20 g/L溶血标本CEA检测CEA阳性例数分别为1,10与14例,经与空白进行χ2检测,P值分别>0.05,<0.01与<0.01。
3 讨论
根据上述结果,无论溶血或者带血球标本均影响CEA结果的判断。其原因为红细胞中的亚铁血红素具有类似过氧化物酶的活性,其作用效应与辣根过氧化物酶类似。如果反应孔因非特异性吸附红细胞残留,加入的TMB底物液产生显色反应,造成假阳性结果。随着溶血程度的加重和红细胞浓度的升高,CEA的似阳性率也呈上升趋势。当溶血达到20 g/L和红细胞在0.25×1012/L时有93%(14/15)的结果呈假阳性,可能会引起严重后果。综上所述,溶血标本和带血球标本对ELISA一步法检测CEA有干扰作用。在血红蛋白浓度低于5 g/L,红细胞含量低于0.0625×1012/L时虽无统计学意义(P>0.05),但还是有6.6%的假阳性结果出现。因此,我们在日常工作中应尽量避免溶血标本进入实验室,如果遇到血清量少时也不应勉强操作,避免将血球混入血清中加入反应孔内。CEA的假阳性不仅容易误导临床医生,同时也会使患者产生精神压力,所以在报告时应注明“标本溶血建议复查”等提示性内容。
作者单位: 061001 河北省沧州市中心医院检验科
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