刘丽花 卜宪岭 李卫红 马学志 周红 王莹莹 刘晓松 党静 刘淑君

    我国艾滋病传播渠道正在转变为以性传播为主，男男性接触者(men who have sex with men，MSM)HIV感染率已由2005年的0.4%上升到目前的4.9%，最高的地区甚至达到15%[1]，成为继静脉吸毒人群、有偿献血人群之后的第三大易感人群。为了解MSM人群中HIV-1的亚型分布特点，从分子水平阐明HIV-1流行线路和流行时间，指导对该人群的干预措施的设计和实施工作，对石家庄市2006至2008年报告的MSM感染者的HIV-1 env基因的C2-V3区进行了基因序列测定和分析。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 51例均经HIV抗体初筛与确认(WB)试验证实为HIV-1抗体阳性的MSM。年龄18～50岁，平均年龄26岁;本市37例，本省其他市10例，外省4例。进行流行病学调查的同时采集0.15%乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血5 ml，-20℃保存备用。

    1.2 前病毒DNA的提取 取200 μl全血，使用QIACGEN公司QIAamp Blood DNA试剂盒提取前病毒DNA，-20℃保存备用。

    1.3 基因片断的扩增 用nest-PCR对HIV-1env外膜蛋白基因C2-V3区及邻近基因区668 bp进行扩增。以ENV-D5、ENVD12为外侧引物进行第1轮PCR反应，25 μl反应体系(10×buffer 2.5 μl ......