刘春在 冯忠军

    乙型肝炎(乙肝)是我国发病率较高的传染病之一,已经成为危害广大人民群众健康的社会公众性问题,近年来随着对乙肝表面抗原大蛋白中前S区抗原在乙肝发病机制、感染与复制等方面研究的深入,研究者们逐渐认识到乙肝表面抗原前S区具有越来越重要的临床意义[1-3]。HBV S基因编码合成的HBV外膜蛋白由 3种蛋白组成,包括小蛋白、中蛋白和大蛋白。小蛋白即 HBsAg,中蛋白即 HBsAg和 PreS2Ag,乙肝病毒大蛋白(HBV-LP)即 HBsAg,PreS2Ag和 PreS1Ag。研究发现HBV-LP前 S区在空间上具有独特的双重拓扑结构,在包膜内侧可以和HBV核壳体膜结合,外侧可与易感受体结合,是HBV颗粒成熟包装的关键[4]。由于单独的前S区抗原作为乙肝表面抗原大蛋白的一部分,无法模拟其复杂的拓扑结构,通过此方法制作的单克隆抗体只具有线性表位,这种针对低级结构抗原制作出的单克隆抗体在实际运用中便有可能造成漏检。我们利用构象型前 S区的高亲和力、高特异性的单抗来检测血清 HBV-LP以及比较其与HBV DNA以及前 S1抗原(PreS1Ag)的检出情况,验证HBV-LP在乙肝诊治中的临床意义。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 416份血清标本均来自 2006年 3月至 2007年 2月河北医科大学第三医院门诊或住院的乙肝患者,男 296例,女 120例;年龄 3～79岁,平均年龄 36.2岁。所有病例选择均符合 2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会制定的《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准[5],并排除合并感染其他病毒性肝炎,排除心、脑、肾、肺等器官疾病及高血压、糖尿病等。其中 HBV DNA阳性血清标本 253份。

    1.2 试剂与仪器 试剂：HBV-LP酶免定量检测试剂盒由北京热景生物技术有限公司提供;乙肝病毒标志物(HBV M)检测试剂盒来自厦门英科新创生物有限公司;PreS1Ag检测试剂来自上海阿尔法公司;PreS2Ag检测试剂由北京肝炎试剂研制中心提供;HBV DNA荧光定量试剂盒由广州达安基因股份有限公司提供;所有试剂均在有效期内使用。仪器：芬兰 Labsystems Dragon公司的Wellscan MK 3全自动酶免分析仪;北京普朗新技术有限公司生产的洗板机;美国 ABI公司的 7000全自动荧光PCR仪 ......