免疫组化染色质量控制在乳腺组织切片中的应用
组织化学,着色,1材料与方法,2结果,3讨论
郭秀芳乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,发病率占全身性肿瘤的 7%~10%,在女性仅次于子宫癌,已成为威胁女性健康的主要病因。本病的发病与遗传有关,绝经期前后的女性发病率较高,是一种通过发生在乳腺上皮组织严重影响女性身心健康,甚至危及生命的最常见的一种恶性肿瘤之一[1]。由于乳腺的主要成分是脂肪,易造成石蜡切片的不完整性,我们探索自己实验室的工作条件,及各种抗体的实验条件来控制标准化实验流程,稳定乳腺石蜡切片及其免疫组化染色的质量报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料 来自本院临床近 2个月送检的乳腺标本,医用可调控 16寸高压锅,2 000 kW电炉。
1.2 要试剂 PBS液(pH值 7.4),第一抗体为兔抗人雌激素受体(ER),兔抗人孕激素受体(PR),兔抗人CerbB-2单克隆抗体,第二抗体为快捷免疫组化Elivision试剂盒,DAB试剂盒,均购自福建迈新公司。
1.3 组织切片的制片 乳腺标本经 10%中性甲醛充分固定后,取其中病变组织,经过梯度酒精充分脱水,二甲苯透明,58℃石蜡浸蜡,60℃石蜡包埋制成蜡块,一次性刀片进行切片,切片厚度为 2~3μm,40℃水温展片,水中可加适量的乙醇,因其有张力,使切片能充分展开,无折皱,用经 APES防脱片处理过的载玻片捞片 ......
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