孙志平 刘建辉 吕翠环

    随着糖尿病发病率的增高及结核病的回潮,糖尿病合并肺结核的发病率也在逐年增加。本文观察糖尿病合并肺结核患者外周血转化生长因子 β1(TGF-β1)、sFas/sFasL和 T淋巴细胞凋亡的变化,意在探讨 TGF-β1、sFas/sFasL系统及 T淋巴细胞凋亡在糖尿病合并肺结核发生发展中的作用,为糖尿病合并肺结核早期干预治疗和判断病情提供实验室依据。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 正常对照组 10例,其中男 7例,女 3例;平均年龄 33岁。均为医院查体正常人员,经病史、查体、仪器与实验室检查排除糖尿病、肺结核病、冠心病等疾病。肺结核组 20例,其中男 12例,女 8例;平均年龄 43岁。根据临床表现,胸片及胸部 CT确诊 6例,痰菌检查确诊 14例。糖尿病组 20例,其中男 12例,女 8例;平均年龄 51岁。根据其空腹血糖、尿糖及糖耐量实验等确诊。糖尿病合并肺结核组 15例,其中男 9例,女 6例;平均年龄 55岁。根据其病史、胸部 X线检查,痰菌检查确诊。

    1.2 实验方法 常规收集血清,ELISA法测定 TGF-β1及sFas/sFasL含量,实验步骤严格按照试剂盒说明书进行操作。TGF-β1试剂盒购自深圳晶美生物工程有限公司。人类sFas及sFasL ELISA试剂盒,购自上海森雄科技实业有限公司。抽取EDTA抗凝血,离心分离外周血单个核细胞(PBMC),使用染色缓冲液清洗 3次,加入抗 CD 3-PC7、抗 CD 4-PECy5和抗 CD 8-ECD一起在冰上染色 30m in,清洗 2次并在磷酸盐缓冲 0.9%氯化钠溶液重悬浮后,用结合 PE的 AnnexinV(AV)染色30min,溶解红细胞后稀释和固定,用 Coulter流式细胞仪分析,每个样本分析 50 000个细胞,凋亡结果以阳性细胞百分率(%)表示 ......