应凤博 薛景凤 高燕军 米艳娟 杨广成 赵晓丽 陈志宏

    多发性脑梗死性痴呆模型的建立及评价

    应凤博 薛景凤 高燕军 米艳娟 杨广成 赵晓丽 陈志宏

    目的 建立一种有机微血栓所导致的多发性脑梗死性痴呆动物模型,模拟临床上多发性脑梗死性痴呆病的发生。方法 于左侧颈外动脉逆行插管至左侧颈总动脉的分叉处后,注入有机微血栓,造成多发性脑梗死动物模型。采用 Morris水迷宫的方法观察多发性脑梗死性痴呆大鼠行为学变化,应用光镜观察多发性脑梗死性痴呆大鼠海马的形态学改变。结果 (1)行为学测试：模型组的学习成绩较正常对照组和假手术组明显下降。(2)形态学观察结果：HE染色：模型组左侧脑组织多部位可见局部缺血性气沉沉改变,神经细胞胞体不同程度缩小,胞浆尼氏体减少或消失,核固缩,核碎裂,核溶解。Nissl染色：模型组实验侧海马 CA 1、CA 2、CA 3、垂直部、齿状回等梗死区可见细胞排列稀疏,有明显的细胞脱失,大量的胶质细胞增生,核固缩,胞浆内尼氏体溶解,甚至消失。正常对照组和假手术组及模型组正常对照侧无上述病理改变。结论 本模型是进行多发性脑梗死性痴呆基础研究和临床研究的理想动物模型。

    多发性脑梗死性痴呆;动物模型;大鼠;海马;行为学测试

    自 20世纪 70年代以来,陆续出现的大鼠脑缺血模型有几十种,这些方法均有不足之处,在病理表现上均与多发性脑梗死性痴呆有一定差异。本实验参照Kaneko等[1-3]猪脑栓塞动物模型的建立及评价并加以改进,利用正常人血浆纤维蛋白,创造一种有机微血栓,进而建立一种有机微血栓所导致的多发性脑梗死性痴呆动物模型。

    1 材料与方法

    1.1 动物与分组 Wistar成年大鼠 60只,10月龄,体重 250～350g,雌雄不限。将 60只大鼠随机分为正常对照组、假手术组和模型组,每组 20只,模型组实验过程中死亡 5例。

    1.2 药物与试剂 凝血酶,规格 500 U;0.9%氯化钠溶液;水合氯醛;多聚甲醛;磷酸氢二钠;磷酸二氢钠;焦油紫;苏木精;伊红等。

    1.3 实验仪器 Morris水迷宫,由中国医学科学院药物研究所制;超声波细胞粉碎机;高频电刀;振荡切片机;Olympus光学显微镜等。

    1.4 实验方法

    1.4.1 有机微血栓的制备：取正常人血浆(含血小板)1ml迅速加入凝血酶500U,凝固后置于 0.9%氯化钠溶液中反复漂洗,用超声波细胞粉碎机将其打碎,使栓子直径多在 20～40μm,再用0.9%氯化钠溶液将其配成 10mg/ml的栓子混悬液 ......