邓守恒 杨敬宁 曹凤军 蔡晓军 邓守平 陈萍

    壳聚糖 [β(1,4)-2-氨基-2-去氧-D-葡萄糖]是一种来源于海洋生物的碱性生物多糖,具有抗肿瘤、抗炎、抗菌等多种生物活性,且生物相容性良好,几乎无毒性及其他不良反应,在现代药物制备中经常作为良好的药物材料进行开发[1]。硒是人和动物体内必需的微量元素之一,亦具有广泛的抗氧化,抗肿瘤,抗炎等活性,硒化壳聚糖[2]是将壳聚糖与亚硒酸在酸性条件下,以混合金属离子为催化剂,通过拼合原理制备的有机硒,具有硒和多糖的双重功效。本实验观察了硒化壳聚糖对体外培养的人皮肤成纤维细胞增殖的影响,并分析了可能的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 药品与试剂 硒化壳聚糖由福建医科大学药化系合成,含硒量为 0.4%;DMEM培养基、胰蛋白酶、二甲基亚砜(DMSO)及小牛、胎牛血清购自 Gibco公司;乳酸脱氢酶(LDH)、四甲偶氮唑蓝(MTT)购自 Sigma公司;3H-脱氧胸腺嘧啶核苷酸(3H-TdR)购自北京中国原子能研究所。

    1.2 实验仪器 多孔细胞样品收集器(上海分析仪器总厂);倒置显微镜(日本 Olympus公司);BeckmanLX20全自动生化测定仪(美国 Beckman Coulter公司);Medal680酶标仪(美国 Bio-Rad公司);LS3801型液闪计数仪(美国 Beckman Coulter公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 细胞培养：将术中取下的包皮在无菌条件下漂洗,剪成1mm×1mm×1mm组织块,培养于含 15%胎牛血清的DMEM培养液中,置 37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养,每 3天换 1次液,待长成致密单层后,用浓度为 2.5 g/L的胰酶消化,按体积比为 6传代,第 6代细胞用于实验[3],用细胞培养液配制硒化壳聚糖,根据硒化壳聚糖浓度不同分为空白对照组、25、50、100、200、400mg/L共 6组 ......