魏明 田临红 程义新

    HIV/AIDS实验室检测进展

    魏明 田临红 程义新

    获得性免疫缺乏综合征;临床实验室技术;进展

    获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome)简称艾滋病(AIDS),是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,H IV)感染所引起的一种严重的传染性疾病。实验室检测一直是诊断 HIV/AIDS的主要依据。自1985年第一代 HIV抗体问世以来,HIV病原学检测方法有了长足的进步。各种检测 HIV的新技术层出不穷,实验室检测方法也在不断提高和更新。本文就近年来 HIV/AIDS实验室检测的研究进展综述如下。

    1 HIV的结构特点

    H IV呈球形或卵形,直径 90～130nm,包膜由病毒特有的蛋白质附着于一薄层类脂质构成。其核心含有两条相同拷贝的 RNA链,其外周是由多种蛋白质形成的核膜。HIV同其他逆转录病毒一样,基因组中存在三个大的开放读框,其顺序是gagpolenv.Gag基因编码 55 kD的前体蛋白,在病毒成熟过程中,被 pol基因编码的蛋白酶加工,分别产生核心蛋白 P17,核壳蛋白 P24和核酸结合蛋白 P15。P24是核壳组成蛋白,构成病毒的核衣壳,它的结构比较稳定,是 HIV-1型的特异性蛋白。在 H IV-2与 P24对应的是主要核心抗原 P32,为 HIV-2型病毒感染的特异标志。Env编码包膜蛋白,由外膜糖蛋白 gp120和跨膜糖蛋白 gp41组成 (在 HIV-2型病毒中与之相当的是gp110/130和 gp36)[1]。CD4是 HIV最重要的靶细胞,在 CD4淋巴细胞内反转录酶将 RNA逆转录成前病毒DNA,接着整合到宿主细胞基因组 DNA中,而后和细胞一起复制。

    2 HIV抗体检测

    迄今为止,血清学实验依然是 HIV实验室诊断的主要依据[2]。血清学实验即H IV抗体检测,是 HIV感染诊断的常规方法,分为初筛实验和确认实验两个步骤。

    2.1 初筛实验 包括酶联免疫吸附实验(ELISA)、快速检测(RT)实验、尿液 HIV抗体检测等。常用的初筛实验是酶联免疫吸附实验(ELISA),ELISA试剂在经过了第 1代、第 2代、第3代后,已经发展到第 4代检测试剂[3]。1985年,美国 FDA批准使用第 1代ELISA检测试剂,第1代试剂主要以病毒裂解物或部分纯化的病毒抗原包被反应板,以检测血清中的抗体。由于包被的抗原不很纯,假阳性率较高,结果不令人满意 ......