王伟 薛丽霞

    心肌保护的目的是当心脏停跳，生理性冠状动脉灌注停止后，由人工降低和(或)维持心肌细胞的代谢需要，从而最大限度地减少心肌细胞的缺血性损伤，保障心脏复跳后最大限度的心肌细胞结构完整，功能代谢等方面正常。心肌保护的方法，与心肌细胞自身的代谢状况、结构功能特点等密切相关。婴幼儿未成熟心肌与成熟心肌在上述几方面都有较大的差异，因此对成熟心肌的保护方法不一定适宜于未成熟心肌。随着先天性心脏病外科手术的发展，患者日趋低龄化使得未成熟心肌保护课题的研究日益重要，故随着婴幼儿心脏外科的发展，未成熟心肌保护问题亟待解决。目前诱导热休克蛋白(HSP)多用热休克法、感染性休克法等。药物诱导少有报道，而该方法较其他方法更适于临床应用。在体心肌缺血再灌注更接近活体生理。本实验采用幼鼠在体心肌缺血再灌注模型，用川芎嗪诱导 HSP70以观察其对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及幼鼠心肌的细胞的病理改变和细胞超微结构的变化，旨在探索更适合未成熟心肌的保护方法。

    1 材料与方法

    1.1 仪器与材料

    1.1.1 主要仪器:Heracus超速冷冻离心机;Thermo Forma超低温冰箱;FHS-2型可调高速匀浆器;小型动物呼吸机;全自动生化分析仪;多功能心电监护仪;OLYMPUS显微镜及显微摄像系统;JEM-1200EX透射电子显微镜。

    1.1.2 主要材料及试剂:无水乙醇 (分析纯:北京化工厂20010821);甲醛 (分析纯:北京化工厂 20010821);盐酸川芎嗪注射液[北京四制药厂京卫准字第(80)第 422号]。

    1.2 实验动物及分组 取体重 60～75 g SD幼鼠(<21 d)96只，雌雄不限。由本院动物中心提供。随机分为 3组:(1)假手术(sham control，SC)组，(2)缺血再灌注 (ischem ia reperfusion，IR)组，(3)IMP预处理后缺血再灌注(TMP p reconditioning ischem ia reperfusion，TMP+IR)组。 3组于 4个时间点:TMP+IR组腹腔注射 TMP(100 mg/kg)，SC组、IR组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液后 12、24、36、48 h(每个时间点 8只)制作心肌缺血再灌注模型，SC组开胸后左前降支只穿线不结扎。

    1.3 手术操作过程 20%乌拉坦(4mg/kg)腹腔麻醉，做颈部正中切口，气管切开插管做机械正压通气。通气频率65次/min，潮气量 5～6m l。针电极插入四肢皮下，记录心电图 ......