田永利 许志宇 葛林 刘娜

    总黄酮类化合物是广泛地存在于植物中的一类化合物，目前已有近万种总黄酮被鉴定，植物经光合作用产生的一大类低分子量天然物质，在蔬菜、作物、水果等植物中均有分布，此类化合物具有具有保护心脑血管、利胆保肝、清除自由基、抗氧化、抗癌、抗菌、抗过敏、抗炎症、抗病毒等多种生物活性及药理作用。不少总黄酮化合物同时还存在多种功效。

    1 总黄酮含量测定

    中药成分复杂，总黄酮化合物生物活性及药理作用显著，种类繁多，为了明确哪类中药总黄酮含量较高，总黄酮含量测定成为重要方法。选择适当检测方法测量总黄酮含量，有利于提高药物分析准确性。

    1.1 紫外可见分光光度法 严赞开[1]综述了紫外分光光度法测定植物中黄酮含量的方法.重点介绍了单波长法、差示法、双波长法、三波长法、导数法等紫外分光光度法测定黄酮类化合物含量的原理及分析特性。

    1.1.1 紫外可见分光光度法:是以分子吸收光谱为基础的紫外-可见分光光度法，利用某些物质的分子在峰带I(300～400 nm)和峰带Ⅱ(220～280 nm)光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。具有简便、适用性广、准确度、精密度和重现性较好等特点，在总黄酮含量分析中发挥着重要作用。

    1.1.2 比色法:是一些药典最常用的总黄酮含量检测方法，它主要以Al(NO3)3为显色剂，在碱性条件下，利用其与总黄酮形成红色螯合物为特征。常用于总黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al(NO3)3、AlCl3等。

    1.1.3 差示分光光度法简称ΔA法:使用稍高于样品或稍低于样品的标准作参比，测量样品和参比间的相对吸光度。而此相对吸光度又与样品和参比间的浓度差成比例关系，借差示工作曲线而求出样品的含量。

    1.1.4 双波长和导数分光光度法:用于测定吸收光谱曲线重达的混合物的含量而不须用解联立方程，还可分析高浓度及混浊样品，其灵敏度和准确度比普通分光光度法好。在选择波长时，原则上除了要干扰物有相等吸光度外，还要求两波长比较接近，被测组分在该两波长处的摩尔吸收系数相差大些，这样方法的灵敏度会更高。如果将上述双波长分光光度计上两个波长尽可能指近，使只相差1～2 nm，并且同时进行扫瞄，能得到试样一阶导数吸收光谱-吸光度对波长的变化率曲线，即导数分光光度法。

    1.2 色谱测定方法 陈丛瑾等[2]综述了黄酮类化合物含量的色谱测定方法，包括薄层扫描法、高效液相色谱、超临界流体色谱等，旨在为黄酮类化合物的研究、开发、应用提供参考。

    1.2.1 薄层扫描法(TLCS):亦称薄层光密度法(TLC-Densitometry) ......