李巧敏 赵宏儒 赵翠英 李保军 苗香芬 路新利 胡园园 邢辉

    HIV具有高度变异的生物学特性，使得其在传播过程中产生了许多相对独立的基因序列特征的组和亚型[1]，同时形成了特定地区或特定人群的不同亚型分布。为及时掌握河北省艾滋病病毒1型(HIV-1)的主要亚型类别和分布特点，监测不同人群中亚型毒株的分布和基因变异规律，对2008年新发现的HIV-1感染者开展HIV-1流行毒株亚型分布和变异情况研究，报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 在2008年新报告的HIV感染者中随机抽样64份，其中性传播途径44例(异性传播14例，同性传播30例)，血液传播4例，吸毒传播5例，不详9例。

    1.2 样品采集与处理 在对2008年新发现的HIV感染者进行流行病学调查时，用真空抗凝采血管采取静脉血，分离血浆和淋巴细胞富集液于-80℃备用。使用Qiagen公司QIAamp Viral RNA Mini Kit或Roche公司MagNA Pure LCsystem核酸自动提取仪按照说明书提取血浆样本的病毒RNA。

    1.3 HIV基因扩增和纯化 扩增gag基因和env基因2个片段确定病毒基因型别。第一轮采用TaKaRa One Step RT-PCR试剂，第二轮PCR扩增基于Tiangen PCR Master Mix，按照试剂说明书操作。所用引物见表1。第二轮PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳，用QIANGEN公司的QIAquick gel extraction kit，按照说明提纯扩增的HIV-1 DNA片段 ......