张国欣 薛兰芬 聂丽敏 王蕾 潘志兰 许静

    肾间质纤维化是多种肾脏疾病的共同特征，是进展至终末期肾病的共同通路[1]。本实验通过单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化动物模型，并进行药物干预，通过免疫组织化学、病理组织学检查等方法检查肝细胞生长因子(HGF)在肾小管间质的表达情况及用药后的变化，进一步了解他汀类药物的肾保护作用机制，为肾间质纤维化的防治提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 药品与试剂 阿托伐他汀钙片(立普妥，进口注册证号:H2030119，10 mg/片，Godeck GmbH生产，辉瑞制药有限公司分装)。兔抗大鼠HGF多克隆抗体。SP免疫组化试剂盒。以上均购自北京中山生物技术有限公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1 实验动物与分组:清洁级健康雄性 Wistar大鼠54只(购自河北医科大学动物实验中心)，体重180～220 g。适应性饲养1周后，随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、阿托伐他汀治疗组(C组)，每组18只。每组又因于术后第3、7、14天分批处死而分为N3、N7、N14组，每组6只。

    1.2.2 动物模型建立:术前空腹12 h，予 2%戊巴比妥钠(50 mg/kg)经腹腔注射麻醉后。下腹正中切口2.5 cm暴露左侧肾脏，分离左侧输尿管，于中上1/3处结扎并剪断，使左肾完全梗阻，后逐层缝合。A组开腹后只游离输尿管，不结扎。

    1.2.3 给药方法:于术前3 d开始灌胃。C组给予阿托伐他汀(10 mg·kg-1·d-1，溶于 0.9% 氯化钠溶液，制成混悬液)，A组及B组给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃。实验期间大鼠自由进食水。

    1.2.4 标本收集与制备:分别于术后第3、7、14天断头处死。留取血标本2 ml，检测血清总胆固醇(TC)。迅速切取左肾，去除包膜，按冠状位纵行剖开，置于10%中性甲醛中固定。48 h后行石蜡包埋，将肾组织切成5μm切片，行HE、Masson及免疫组织化学染色。

    1.2.5 生化检查:血标本采用日本Olympus AU-2700全自动生化分析仪测定血TC。

    1.3 病理检查

    1.3.1 组织固定、脱水、渗蜡、包埋:组织块置于10%中性甲醛中 ......