张春宝 何世学 何芳 李媛媛 陈刚 高洪志 郝光涛

    克拉霉素(Clarithromycin)是大环内酯类抗生素，适用于革兰氏阳性菌、部分革兰氏阴性菌、厌氧菌及支原体、衣原体等非典型病原体所引起的感染。因其吸收后血药浓度低，有必要建立选择性好、灵敏的分析方法测定其血药浓度，研究其临床药代动力学[1-6]。国内外对生物样本中克拉霉素的测定方法有气相色谱法、液相色谱法、液相色谱-串联质谱联用法等，但很多方法都存在一定的局限性，如样本处理过程复杂，色谱条件复杂(梯度洗脱)等，为了研究克拉霉素磷酸酯片的人体药代动力学，本实验拟建立高效灵敏准确专属性强的方法以测定人血浆中克拉霉素浓度。

    1 对象与方法

    1.1 仪器与试剂 API3200型三重四极杆串联质谱仪:美国Applied Biosystems公司产品，配有电喷雾离子化源(ESI)，色谱工作站为Analyst1.4.2数据处理软件 (美国AB公司)，液相色谱仪是岛津(SHIMADZU)高效液相色谱系统，包括二元输液泵、自动进样器、柱温箱。克拉霉素对照品购于中国药品生物制品检定所，含量为99.0%，批号:30356-200403;替米沙坦对照品(内标)由北京昭衍新药研究中心提供，批号:010600160，纯度99.5%。甲醇和甲酸均为色谱纯，为Dikma公司产品;试验用水为去离子水，是本实验室自制;其他试剂为AR试剂。

    1.2 溶液的配制

    1.2.1 克拉霉素标准溶液的配制:精密称取克拉霉素对照品10.0 mg，置于50 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得200.0μg/ml克拉霉素的标准储备液。

    1.2.2 克拉霉素标准溶液的配制:取上述储备液以甲醇依次倍比稀释，配成浓度分别为 10、25、100、200、500、1 500 和3 000 ng/ml，即得。

    1.2.3 内标(替米沙坦)标准溶液的配制:精密称取替米沙坦对照品10.0 mg，置于50 m l容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得200.0μg/ml的内标储备液，取该储备液加入甲醇倍比稀释至200 ng/ml ......