崔智

    肝癌是一种病死率极高的恶性肿瘤，目前采用手术切除加化疗介入治疗，放疗等多只是延缓症状，完全治愈非常困难[1-3]。自古中医就对肝癌的病机、症状皆有详尽的论述，现代中药药理学研究显示，很多中药复方具有抗肿瘤作用，或扶助正气，有助于机体抗御病邪;或通过调整机体免疫力、阻断细胞突变、诱导肿瘤细胞凋亡、抗炎排毒治疗恶性肿瘤;或直接对肿瘤细胞具有抑制作用;或直接特异性杀伤肿瘤细胞[4]。华蟾素注射液是以蟾皮为主要原料研制的一种水溶性制剂，具有良好的抗肿瘤作用，广泛用于恶性肿瘤临床治疗，如胃癌、食管癌、膀胱癌、白血病等[5，6]。本研究观察华蟾素注射液联合化疗对BALB/C小鼠原位移植H22肝癌肿瘤的抑制作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物:BALB/C小鼠40只，均为雄性，体重20～25 g，7～8周龄。南方医科大学实验动物中心提供，动物许可证号:SCXK(粤)2006-0015。小鼠移植性肝癌瘤株，由华西医科大学肿瘤研究所提供。

    1.1.2 试药:华蟾素注射液:安徽金蟾生化股份有限公司，5 ml/支;5-氟尿嘧啶(5-Fu):天津氨基酸公司人民制药厂，针剂，250 mg/支。灭菌0.9%氯化钠溶液稀释至2.5 mg/m l后分装于EP管并用锡纸避光常温保存。

    1.1.3 仪器:流式细胞仪(EPICS型):美国 Beckmancoulter公司;自动平衡离心机(DT5-6A):北京时代北利离心机有限公司;酶标仪(生物梅里埃中国有限公司);电热恒温培养箱，Eppendof管，小鼠肿瘤坏死因子α酶联免疫分析试剂盒(上海希美生物科技有限公司);LKB-V型切片机。

    1.2 方法

    1.2.1 分组:将BALB/C小鼠，随机分为4组，每组10只，即模型组，单纯化疗组(5-Fu)，华蟾素注射液组，化疗(5-Fu)+华蟾素注射液组。

    1.2.2 造模及给药方法[7]:小鼠移植性肝癌瘤株，接种于BALB/C鼠腹腔内传代，传代7 d后，无菌抽取乳白色H22肝癌腹水，0.9%氯化钠溶液洗涤2次，每次离心1 000 r/min，5 min。离心后弃去上清，0.2%台盼蓝染色镜检细胞活力 >98%，0.9%氯化钠溶液调整癌细胞数至2.5×107/ml，4℃备用。用盐酸氯胺酮(42 mg/kg)和速眠新Ⅱ(0.42 ml/kg)混合液肌内注射麻醉小鼠。将小鼠仰卧，固定于手术台上，常规消毒铺巾，于上腹正中线剑突下做一约0.8 cm的切口进入腹腔。暴露肝脏，轻压双侧肋弓以挤出左肝叶 ......