魏海青 李 军霞 王永利

    肿瘤是一类常见病、多发病，已成为危害人类健康最严重的疾病之一。化学治疗是治疗癌症的主要手段，但化疗药物在对肿瘤细胞发挥细胞毒作用的同时，会引起一系列的不良反应，如骨髓抑制、消化道反应等。因而，近年从天然药物中寻找高效低毒的抗肿瘤药物成为研究热点[1，2]，菊科旋覆花属植物欧亚旋覆花素是一种传统中草药，具有抗炎，抗肝炎、抗肝损伤等作用[3，4]，本实验研究旋覆花素对小鼠肝癌 H22细胞株、小鼠肉瘤S180细胞株、人肺腺癌A549细胞株、人卵巢癌SK-OV3细胞株及人宫颈癌Hela细胞株的生长抑制作用，并将同一浓度对以上5种肿瘤细胞的生长抑制作用进行对比，了解其对以上5种肿瘤细胞的生长抑制作用特点。

    1 材料与方法

    1.1 材料 细胞株:小鼠肝癌H22细胞、小鼠肉瘤S180、人肺腺癌A549细胞、人卵巢癌SK-OV3细胞、人宫颈癌细胞株Hela细胞。河北医科大学药理教研室传代保存。

    1.2 药品与试剂 RPMI-1640培养基和小牛血清购自美国GIBCO公司;青霉素、链霉素购自华北制药厂;顺铂注射液(DDP)购自南京制药厂;二甲基亚砜(DMSO)、MTT、丫啶橙、溴化乙锭购自美国Sigma公司。旋覆花素由河北医科大学药理教研室药学院自制。

    1.3 主要仪器 VD-1320型洁净工作台产自哈尔滨市东联电子技术发展有限公司;CO2培养箱产自日本 Sanyo公司;Floustar多功能分析仪产自德国BMG公司;平板离心机产自德国eppendorf公司;XDS-1B型倒置生物显微镜产自重庆光电仪器有限公司;激光共聚焦显微镜产自德国Leica等。

    1.4 方法

    1.4.1 细胞培养及实验分组:取对数生长期的 H22、S180、A549、SK-OV3、Hela细胞，调整细胞浓度为1×105个/ml的细胞悬液。将细胞悬液种植于96孔培养板中，每孔100 μl，按分组方法加入相应的药物，置5%CO2、37℃培养箱内培养72 h，每孔加入MTT溶液20 μl(5 mg/ml) ......